请教卵巢免疫组化问题

相关实验：小鼠脑片免疫组织化学（ABC 法）实验

实验小助理静静

2022-06-09

请教各位同志，最近一直在做猪卵巢pcna的免疫组化，我想问一下我染的为什么颜色那么深，都快成黑色了，是DAB颜色和苏木精颜色重叠了吗，还有我想问一下

我染的部位是卵泡吗，如果是的话是什么卵泡吗，初学者不太会请各位指点一下，谢谢！

2 个回答

天一湖医者

2022-06-09

有帮助

1.先不复染，观察一下，看是否核、质均有表达，再用苏木精副染核，看核周围胞质还有无信号。

2.如果核表达不确定，可以用染胞质的复染染料如快绿，这样就可看到核中信号是否存在。

bamboopiggy

2022-06-09

有帮助

如果染色太深，建议减少一抗的浓度。或者缩短染色时间。原始卵泡中的卵母细胞能检测到PCNA的表达，但颗粒细胞并未观察到PCNA的免疫染色；初级卵泡到次级卵泡，卵母细胞和颗粒细胞中均可检测到PCNA的表达，且在颗粒细胞中的表达有增强的趋势；有腔卵泡中，颗粒细胞、卵泡膜细胞及包围卵母细胞的卵丘细胞中都能观察到很强的免疫染色