实验问答21,944,264 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问流式染色是不是一定要避光进行？

土井挞克树

看你的荧光类型，见光会严重影响荧光的结合，建议避光。

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问MCC950

土井挞克树

一般10um预处理细胞，在加入lps之前进行预处理

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问肺癌 H460细胞

土井挞克树

不正常，提高血清营养，不然容易死掉

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问蔗糖密度梯度离心分离细胞组分

huarenqiang5

步骤如下：（一）组织匀浆制备A 取材将空腹 12 h 的大鼠拉颈处死。剖开腹部，迅速取出肝脏，用生理盐水洗净血污，滤纸吸干。B 制备匀浆称取约 2 g 左右的肝组织，用预冷的 0.25 mol/L 的蔗糖溶液冲洗数次，再剪碎。以预冷的 0.25 mol/L 的蔗糖溶液悬浮剪碎的组织（9 ml/g），倒入匀浆器内，在冰浴条件下匀浆。匀浆完成后，用双层尼龙布过滤，即制得肝细胞匀浆，备用。（二）密度

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问【急】动物组织提取DNA

秋秋欣欣

1.实验前动物应饥饿12h以上。 2.称取组织，放在培养皿中，用剪刀剪碎，放入匀浆器研磨,加入6ml，氯化钠-柠檬酸钠缓冲液，装在10ml 离心管中。将匀浆物在4000r/min下离心1 0min。3.将上述沉淀转入50m1大试管中，加入6ml氯化钠-柠檬酸钠缓冲溶液、3ml 氯仿-异戊醇混合液，0. 5m1SDS使其终浓度为0.41%,手摇15min，然后缓慢加入氯化钠固体(有0. 55g)，使

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问求，新西兰兔麻醉药物及用量

loveliufudan

兔子常用的麻醉药物包括异氟醚、七氟醚、地西泮和氯胺酮等。使用哪种麻醉药物取决于实验的具体需求和兔子的体重、年龄等因素。常用的剂量范围如下：异氟醚：2-5%浓度，每分钟流量1-2L/min；七氟醚：1-3%浓度，每分钟流量1-2L/min；地西泮：2-5 mg/kg，可以与其他药物联合使用；氯胺酮：20-40 mg/kg。

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问小鼠胃癌模型求助

loveliufudan

胃癌小鼠移植瘤和转移瘤模型是研究胃癌生物学和治疗的重要模型之一。一般可以使用人类胃癌细胞系在小鼠体内移植建立胃癌模型。以下是一些常用的胃癌细胞系和小鼠模型：胃癌细胞系：MKN-45：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于建立胃癌移植瘤和转移瘤模型。AGS：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于胃癌生物学和治疗的研究。NUGC-3：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于胃癌转移瘤的研究。小鼠模型：裸鼠模型：将胃癌细胞注射到

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问求助有没有做神经源性ED大鼠模型

loveliufudan

大鼠盆腔神经节图谱可以在一些神经科学的研究文献中找到。以下是一些可能有用的参考文献：Coelho, A., Ladeira, M., Reis, F., & Rodrigues, A. J. (2013). A neuronal population in the rat ventromedial hypothalamus is activated by estrogens, medrox

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问求助：大鼠脊髓背根神经节神经元DRG细胞的培养，DRG原代培养

fghjjd

请问培养浓度是多少？请问你自己分离的神经元还是买到的？

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问共聚焦铺细胞

dxyc42u

这种情况有可能是板子材质的问题，建议排查下

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问2，3-BPG旁路

loveliufudan

2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)旁路，也称为拉普曼途径，是一种在糖酵解过程中通过将1,3-二磷酸甘油转化为2,3-BPG来产生ATP的代谢途径。在这个过程中，2,3-BPG被用来调节氧气亲和力，因为它可以与氧气分子竞争与血红蛋白分子上的结合位点，从而导致氧气释放到组织中。这个过程发生在红细胞内部。

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问各位前辈，想请教下，豚鼠皮肤组织10%中性甲醛固定2个月后，脱水时常该怎么调整呢，谢谢各位

土井挞克树

脱水一半都用乙醇，建议脱水前用pbs漂洗，效果好一些。

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问肠道菌群研究中16srna与16sdna有什么区别？

dxyc42u

16sdna比16srna稳定，不易分解，检测相对简单些

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问小鼠脑立体定位注射损伤（针孔明显及附近有梗死，求解决办法及建议）

土井挞克树

一般来说损伤在所难免，小范围的损伤影响不大

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问用大鼠腹腔静脉血进行流式检测可以吗

土井挞克树

可以的，建议处理掉混杂细胞，这样筛选准确率高

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问求助！请教多处理因素治疗前后的组间比较应该用什么统计方法？

土井挞克树

队列研究，或者时间重复的方差分析。

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问求助求助

土井挞克树

可以加用pbs稀释，溶解效果会好一些。

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问小鼠眼球取血

loveliufudan

小鼠眼球取血时可能会发生溶血，通常是由于取血时操作不当或使用不当的采血器具所致。以下是一些可能有助于避免小鼠眼球取血时发生溶血的建议：确保采血器具的选择适合小鼠的年龄和大小。注意使用正确的采血技巧，避免损伤血管或血细胞。在取血前，将采血器具预先冲洗并预热至体温。确保采血时的速度适中，不要过于迅速或过于缓慢。在取血时，可以将小鼠固定在柔软的抱垫上，以避免运动和挣扎。采血后，尽快将采集的样本放置在冰上

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问小鼠脾脏取T细胞

sswei

小鼠脾脏取T细胞步骤:1. 小鼠颈椎脱臼处死，75%乙醇浸泡5分钟，取出小鼠置于无菌操作台上，左腹侧朝上；2. 在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏；3. 在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离下面的结缔组织，取出脾脏；放入盛有5ml 不完全培养液的培养皿中冲洗，剥去周围的结缔组织。4.A、梳刮法：脾脏可用镊子轻轻梳刮，避免将脾脏弄成碎片，

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问小鼠子宫内膜上皮细胞的分离和培养

dxy_ri21al48

请问现在分离成功了吗？方便写到这个回答里面吗？

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