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科研学霸天团，48小时有问必答

问测定小鼠cTnT、LDH 、 CK-MB和BNP，是需要血清还是心脏组织

huarenqiang5

测定小鼠cTnT、LDH、CK-MB和BN P一般选用血清进行测定。

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问想问问有没有大神可以指点一下，我的小鼠造模半天内就出现死亡并且眼睛上有白点的现象，这是怎么造成的，该怎么处理提高小鼠造模成功率?

huarenqiang5

从以下几个方面来提高造模成功率：（1）挑选合适线栓，满足一下几点要求：线栓不可过硬。过硬线栓容易找手感，但是容易出现刺破蛛网膜下腔血管，导致颅内出血。同时过硬线栓还会改变血管自然形态，当线栓插入血管以后，因为线栓过硬，血管肌张力无法使得线栓改变形态，只能被线栓改变形态，导致血管处于紧绷状态，对于再灌注操作不利。选择硅胶头尽可能接近圆柱形的线栓，这样当线栓进入MCA外后，能够完全堵塞MCA，而不会出

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问大鼠牙周缺损模型如何控制缺损大小？

huarenqiang5

按以下几点建议进行可以很好的控制缺损大小：建议在牙科显微镜下操作,可以精确地控制缺损大小,在后期实验中可以做到制备定量缺损。上颌第一磨牙近中根长度大约 4~5 mm,在做缺损前要注意不应过度磨损,以免与上颌窦穿通。用16cm血管钳撑开大鼠口腔,碘酚对上颌磨牙及近中黏膜区进行表面消毒,沿着大鼠上颌第一磨牙近中端部位用刀片割开3mm左右，上下颌完全分开,

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问Tau磷酸化位点很多，抗体怎么选，有什么区别？

土井挞克树

就我所做的tau抗体来说说我觉得你选择tau1,tau5,AT8三种抗体就可以了tau5可以作为tau总蛋白的定量而tau1，磷酸化位点为ser199/202.在体时主要标轴突的。

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问为什么只能在10微米以上情况下使用 Triton-X100？

sswei

Triton X-100是非离子型表面活性剂，在4%多聚甲醛固定过程中起着增加细胞膜通透性的作用！是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂)，该产品经常被用于水中帮助分解蛋白酶；但是，必须使用尽可能低的浓度否则会污染样品。高浓度可以裂解细胞,而低浓度可以增加细胞膜的通透性。Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）能够溶解细胞脂质，他可以增加细胞膜对抗体的通透性。在免疫细胞化学中，T

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问免疫组化实验中，出现边缘效应怎么办？

loveliufudan

这可能是由于标本处理、抗体染色、显微镜成像等因素引起的。以下是一些可能的解决方法：在标本处理过程中要尽可能避免损伤标本边缘，特别是在切片过程中。在抗体染色前，将标本边缘用胶带覆盖，以减少标本边缘的信号干扰。在显微镜成像时，尽可能调整焦距和曝光时间，确保标本中央和边缘区域的信号平衡。如果使用数字成像系统，可以对图像进行后处理，如修剪边缘区域或调整图像亮度和对比度等。对于细胞免疫组化，可以尝试调整细胞

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问请问配制1%的STZ溶液如何计算试剂量

loveliufudan

以下是柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的配制方法和计算步骤：首先确定你要制备多少升缓冲液，比如说1升。根据你要制备的升数和缓冲液的配方，计算出你需要的柠檬酸一水和柠檬酸三钠二水的质量，可以通过配方中的摩尔比例计算。具体计算公式为：质量（g）= 摩尔质量（g/mol）× 摩尔数（mol）× 升数（L）例如，你要制备1升柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，pH为6.5，配方为A液：0.1 mol/L 柠檬酸一水，B液：0.

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问人和小鼠的中性粒细胞大多是Ly6G，CD11b/c，大鼠的中性粒细胞标志物，文献里很少有，也不统一，流式用什么标记比较好？

loveliufudan

人和小鼠的中性粒细胞表面标志物确实大多是Ly6G和CD116/C。对于大鼠中性粒细胞的表面标志物，虽然文献中不太统一，但是CD11b和Ly6G被广泛认为是大鼠中性粒细胞的标志物。对于流式细胞术的标记选择，通常建议使用多个标记共同检测目标细胞。对于人和小鼠中性粒细胞，常用的标记包括Ly6G、CD11b、CD15、CD16和CD66b等。对于大鼠中性粒细胞，常用的标记包括CD11b、Ly6G、CD45

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问免疫组化中，标本的着色位置不对一般是什么原因造成的？

huarenqiang5

可能原因为：1.固定原因；2.修复过度；3.抗体质量原因；4.一抗浓度过高或实验温度过高、时间过长。

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问荧光免疫组化实验中，和核染对照组超过多少百分比一致才认为目的蛋白是核表达？

huarenqiang5

和核染对照组一般要超过80%时才表示目的蛋白是核表达。

3 回答231 围观

问免疫组化大家一般实验组纳入多少病例数？

huarenqiang5

免疫组化实验组至少4-6病例数。

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问大鼠处死后，心肝脾肺肾等各器官需要多久内固定才能较好地保存组织结构，求大神解惑~

huarenqiang5

一般固定12至24小时最为合适。

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问免疫组化问题求助？？

huarenqiang5

100℃水浴加热法，一般不会导致组织里面的蛋白、酶等生物活性物质失活。沸热修复电炉或水浴锅加热0.01柠檬酸钠缓冲液（ph6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10-15分钟。

3 回答283 围观

问请问，组化拍片，DAB颜色很深，不明亮，像树皮的颜色。我的DAB是5s左右就放入PBS洗了，不知道为什么会这样。

sswei

显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间；此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间。

4 回答312 围观

问cleaved caspase3蛋白做免疫组化的时候，用什么抗原修复方式最好，破膜比例多少合适？

土井挞克树

一般建议用微波加热修复法推荐的修复液：常用柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）。

2 回答698 围观

问免疫组化总是会脱片，是什么原因啊？

土井挞克树

脱水时间是否太长，减少脱水的时间，考虑存在过度脱水。

4 回答1348 围观

问免疫组化结果图很黄，几乎看不到蓝色

土井挞克树

先把ph检查一下，ph不合适就会染不上

3 回答1125 围观

问我对鱼的肠道染色，遇到苏木精的蓝色可以染上，0.5%伊红的红色完全染不上去，可能是哪步出了问题呢？

loveliufudan

对于鱼的肠道染色遇到苏木精的蓝色，但是无法染上0.5%伊红的红色，可能有以下几个原因：染色时间不够：染色时间不够可能会导致染色不均匀或者染色效果不佳，因此可以尝试延长染色时间。染色温度过低：温度过低可能会影响染色效果，因此可以尝试将温度调高一些。pH 值不合适：染色 pH 值不合适也会影响染色效果，因此可以尝试调整 pH 值。组织固定过度：固定过度可能会导致细胞膜破裂，染色剂不能进入细胞内部，从而

3 回答438 围观

问做免疫组化实验组织标本固定时间多久合适？

sswei

免疫组化实验组织标本固定时间一般在24一48小时。

3 回答2046 围观

问免疫组化实验组织脱水、浸蜡不充分会导致什么结果？

sswei

如果组织脱水、浸蜡不充分，蜡块会出现组织收缩凹陷，而且在免疫组化热抗原修复操作时会容易脱片。

3 回答978 围观

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