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        免疫组化总是会脱片,是什么原因啊?

        相关实验:小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验

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        秋秋欣欣

        在水里泡的时间也不久,但边上总是脱片

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        4 个回答

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        土井挞克树

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        脱水时间是否太长,减少脱水的时间,考虑存在过度脱水。

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        loveliufudan

        有帮助

        免疫组化脱片的原因可能有多种,以下是一些可能导致脱片的原因和建议的解决方案:

        切片过厚或过薄:切片过厚可能导致组织结构的紊乱,而切片过薄可能会导致组织薄弱,易于脱落。建议使用适当厚度的切片,通常建议在4-5 μm 之间。

        切片时刀片不够锋利:刀片不够锋利可能会导致组织结构的破坏,建议使用锋利的刀片并在使用前进行调整和检查。

        离子型和非离子型的染色剂:非离子型染色剂通常比离子型染色剂更温和,对组织切片的影响更小,建议尝试使用非离子型染色剂。

        免疫组化过程中的步骤和条件:免疫组化过程中可能会有多个步骤和条件影响结果,例如抗原修复、蛋白结合和显色等步骤,建议对这些步骤进行优化和标准化,以确保结果的可靠性和稳定性。

        切片后未干燥或未固定:切片后应及时干燥和固定,以保证切片的完整性和稳定性。

        组织样本的处理:组织样本的处理可能对结果产生影响,例如固定时间、温度、稳定剂等。建议对样本的处理进行优化,并确保固定的时间、温度和稳定剂等参数合适。

        切片后未正确储存:切片后应储存于适当的温度和湿度条件下,并且应避免长时间的震动和光照,以确保切片的完整性和稳定性。

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        huarenqiang5

        有帮助

        1)脱片是因为片子处理的不好,须把载玻片仔细洗刷,烘干后均匀的涂上新近配置的明胶,竖直晾干备用。

        2)漂洗后,晾片时间太短,可以在晾至组织边缘发白时行显色;如果担心脱片,也可以用漂片法。

        3)DAB显色太快不仅因为抗体特异性不高,还要注意:在配置DAB时,DAB的浓度和加入H2O2的量不能非要按照手册来,当DAB和H2O2的浓度太高时,肯定会出现染色过快的现象,一定要自己多摸索几遍,而且DAB一定要新鲜配制,配好后要避光过滤,在即将显色时才能临时加入H2O2,染色时间最好控制在5分钟之内。

        user-title

        balalaLy

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        脱片可能与切片大小、厚度也有关系,还有石蜡切片烤片时间不够,冰冻切片切好后在室温放置时间太短

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