• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求助过氧化氢损伤模型建立

        相关实验:基于流式细胞术检测细胞凋亡

        user-title

        春风十里WW

        请问各位大神,用过氧化氢建立心肌细胞损伤模型时用到的过氧化氢浓度范围以及作用时间等,希望各位不吝赐教,谢谢🙏 目前在建立模型时,cck8实验的重复性不高,OD值有较大差距!

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        重复性差一方面可能是因为过氧化氢本身不稳定,很容易失效。造模可以用高浓度短时间30min-1小时,或者低浓度长时间。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        一般是用过氧化氢100umol/L的浓度建立

        user-title

        春风十里WWuser-title

        请问您是先接种心肌细胞培养24h后再用100umol/L的过氧化氢去刺激吗?刺激时间是多久呢?您的存活率可以达到多少呢?谢谢啦~

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        建立心肌细胞损伤模型时,过氧化氢的浓度和作用时间需要根据具体实验条件和研究目的进行优化。下面提供一些常用的实验条件供参考:

        过氧化氢浓度:通常在0.1 mM到1 mM范围内进行优化。一般而言,过氧化氢浓度越高,心肌细胞受损越严重,但过高的浓度也可能导致细胞死亡。在优化浓度时,建议采用不同浓度的过氧化氢进行预实验,选择能够诱导心肌细胞受损但不至于导致细胞死亡的最佳浓度。

        作用时间:通常在30分钟到24小时范围内进行优化。过氧化氢的作用时间越长,心肌细胞受损越严重,但过长的作用时间也可能导致细胞死亡。在优化作用时间时,建议采用不同时间长度的过氧化氢进行预实验,选择能够诱导心肌细胞受损但不至于导致细胞死亡的最佳时间长度。

        CCK-8实验:CCK-8实验可以用来评估心肌细胞的活力和代谢状态。CCK-8试剂的使用方法和条件需要遵循试剂说明书中的建议。在进行CCK-8实验时,需要注意以下几点:

        实验前,需要将培养基中的血清去除,以避免血清对实验结果的影响;

        实验过程中,需要将各组实验重复多次,统计多次实验的平均值,以提高实验的可重复性和准确性;

        实验结果的差异可能与细胞密度和接种数有关,因此建议在实验前进行一定的细胞计数和接种数的优化。

        另外,需要注意的是,建立心肌细胞损伤模型是一个较为复杂的过程,除了过氧化氢浓度和作用时间外,还涉及到诱导损伤的其他因素,如温度、氧气浓度、酸碱度等。因此,如果实验中CCK-8实验的重复性不高,可能与其他实验条件或实验技术有关,建议仔细检查实验操作的每一个步骤,寻找可能存在的误差来源。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序