丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

免疫荧光整个细胞都有荧光,无法辨别目的蛋白的表达,抗体浓度也是按师兄师姐说的,怎么解决?

相关实验:免疫荧光技术

user-title

dxy_nkqusvl2


wx-share
分享

5 个回答

user-title

sswei

有帮助

原因有二:一是二抗浓度过高,适当降低二抗浓度即可。二是二抗发生沉淀,可以使用过滤戒者离心荧光标记二抗。

user-title

huarenqiang5

有帮助

你的这个情况还是建议重新做了。

user-title

土井挞克树

有帮助

更换抗体,你这个是典型的非特异性结合的问题。

user-title

loveliufudan

有帮助

解决这个问题的方法可能包括以下几点:

优化免疫荧光实验条件:比如调整抗体浓度、孵育时间、荧光染料浓度等,优化实验条件可以降低背景荧光,提高信噪比,更好地检测目的蛋白的表达。

使用免疫印迹技术:免疫印迹技术是一种常用的蛋白质检测方法,通过电泳将蛋白质分离后,使用特异性抗体检测目的蛋白,可以准确地检测目的蛋白的表达情况。

使用免疫组化技术:免疫组化技术可以用来检测细胞或组织中蛋白质的分布情况和表达水平。与免疫荧光技术不同的是,免疫组化技术使用染色剂或酶作为检测信号,因此可以准确地检测目的蛋白的表达情况。

尝试使用其他方法检测目的蛋白:比如使用定量PCR技术、质谱技术等,这些方法都可以用来检测目的蛋白的表达情况,但需要针对具体情况选择合适的方法。

user-title

balalaLy

有帮助

抗体浓度调低一点或者曝光参数调低,比如曝光时间缩短

ad image
提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序