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        荧光定量PCR，模板浓度够高，CT仍30多，原因何在

        相关实验：免疫荧光技术

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        real time RT-PCR，测了模板cDNA浓度1800ng/ml，纯度在1.96左右，但是检测内参GAPDH，CT值都有30多，目的基因的CT更大了。请问问题在哪里，CT值大不就是因为模板量不够吗，可是现在这个浓度显然是充足的，怎么解释？

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        4 个回答

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        曙光karry

        有帮助

        cdna应该做一个10倍浓度梯度稀释，做3-4个梯度，上样1-2ul

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        李亚彪111

        有帮助

        这种情况就要考虑抑制扩增的问题了，要么浓度高，要么反应体系中有抑制物，要么反应体系有效成分讲解了

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        bamboopiggy

        有帮助

        你的cdna太浓了，稀释到20ng/ul，上1ul就可以

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        土井挞克树

        有帮助

        可以把模版适量稀释后再做定量p c r

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