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        DNA模板浓度的检测

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        2949
        • 实验目的
        了解紫外分光光度计检测的原理。检测所提取DNA模板的浓度。
        二、实验原理
        若OD 260 /OD 280 比值大于2.0,说明存在RNA。可再用RNA酶处理。酚-氯仿-异戊醇(25;24:1)提取,乙醇沉淀和洗涤DNA。
        若OD 260 /OD 280 比值小于1.80,说明存在蛋白质或酚等杂质。可用CTAB提取液消化3小时,重新用酚一氯仿一异戊醇抽提,除去蛋白质等杂质,直至比值接近1.80。
        若OD 260 /OD 280 比值等于1.80,小于2.0说明所提DNA非常纯净。
        三、实验器材
        紫外分光光度计 比色杯   移液枪
        四、实验试剂
        DNA模板  0.1XTE
        五、实验操作
           1、按照操作标准打开 仪器 。调零,设置检测浓度比例。
        2、用移液枪先取0.1xTE 45ul,加入比色杯,再取 DNA模板5ul加入比色杯,用移液枪轻轻搅动,使其混匀。
        3、按比色杯上箭头所指,放入 仪器 ,按smaple 键,
        4、记录DNA模板浓度数值。
        六、实验结果:
           
        序号 浓度 260/280 260/230  
        1        
        2        
        3        

         




        七、注意事项:
        1、 比色杯 的放置
        2、溶液的混匀
        3、 比色杯 的清洗,以免样品之间的污染。

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