大分子量蛋白200KD或以上，在做WB要注意什么呢？

大分子量蛋白做wb需要，考虑抗体孵育的问题，延长孵育时间，跑胶时要注意调整胶的ph，然后wb转膜时间也需要相应延长一下。

用浓度低的胶，比如7-8%的分离胶，然后转膜条件250mA 3小时左右

1.做200kd蛋白的WB时要注意，分离胶最好选择>7%的；剥胶时要小心

2.转移时间需要相应延长；要做分子量参照（否则出现杂带不知道如何分析）

3.Western转膜液中甲醇含量可适当降低，推荐使用湿装转膜效率更高！