有没有什么办法能够去除培养基中的LPS，又不影响实验结果啊

LPS去除方法：

(1) 免疫配基。根据抗原-抗体高特异性结合的机制, 研究者用抗r Hu-TNFa单克隆抗体为配基的吸附柱, 用于清除LPS血症中的LPS。免疫亲和具有高度特异性, 但是这种配基制备困难, 应用范围狭窄, 同时还有价格昂贵、洗脱困难的问题。

(2) 多粘菌素B (PMX-B) 。PMX-B能依靠其环形肽结构降解革兰氏阴性细菌的细胞壁, 其阳离子与类脂A的磷酸基团之间的静电作用力和疏水作用力使其能识别不同来源的LPS分子。采用固定PMX-B的纤维素 (或琼脂糖) 载体去除LPS, 有良好的效果和稳定性。但是PMX-B的价格昂贵, 且有肾毒性和神经毒性, 应谨慎应用。

(3) 脱氧胆酸盐 (DOC) 。DOC是一种表面活性剂, 可以解离破坏LPS因疏水作用而形成的胶束结构, 阻碍LPS的结合实现分离。特别是在较高蛋白浓度的情况下, 对蛋白的回收可以达到100%。有研究者考证了在同等条件下的酸性蛋白溶液中, DOC比PMX-B、DEAE、PEI及PLL更有效, 这可能是因为它作为配基, 电荷密度相对较低, 与荷负电的蛋白分子之间的静电作用较弱。

(4) 聚阳离子。聚阳离子能以静电作用, 范德华力和氢键与LPS分子稳定结合, 以其为配基的吸附介质, 其吸附LPS分子的过程似于絮凝过程, 与蛋白分子的吸附很少。此类配基如聚乙稀亚胺 (PEI) 、聚L-赖氨酸 (PLL) 、聚L-组氨酸 (PLH等, 生物相容性要优于PMX-B, 吸附能力优于组氨酸。

(5) 氨基酸。自20世纪80年代起组胺 (Him) 、组酸 (His就开始作为配基去除LPS。由于His生物活性较高、价格和毒副作用都较小而更受欢迎, 其作用主要来自于连接载体与配体的间隔臂 (如己二胺) 和组氨酸上的咪唑环, 但受p H的影响较大。除组氨酸外, 赖氨酸、精氨酸等氨基酸也被认为能与LPS发生作用。

(6) 其他亲和吸附配基。除以上所述配基之外还有很多种配基如壳聚糖、季铵盐、胺类、多肽类等对LPS的去除也有较好的效果。

(1) LPS分子量大于1万, 依据这个特点, 研究者建立了以下几种方法:

超滤:选用合适的超滤膜可以将溶液中的LPS完全去除, 适用于目标产物分子量小的溶液。

密度梯度超离心:根据LPS与溶液中蛋白质的密度、沉降系数等差异, 利用蔗糖密度梯度超离心的方法来分离除去LPS。然而因LPS不同的存在形式, 分子大小、密度、沉降系数的不同, 此方法应用受限。

活性炭吸附:适合于组分较为简单的小分子的溶液中或水中LPS的去除, 选择性较差, 易吸附有效成分, 残余活性炭不易去除。

分子筛:利用凝胶分子的空间网状结构进行过滤层析, 处理量小, 且耗时长, 适用于蛋白分子量小溶液。

(2) LPS分子的PKa值约为1.3, 溶液中带负电, 由此有以下几种去除方法:

荷电微滤:选用带正电荷的膜材质如聚矾、聚丙烯腈等微孔滤膜进行荷电微滤, 并筛选合适的PH条件, 可提高对LPS分子的去除效果。当然此方法也利用了LPS分子大小的特性。

离子交换:适于从碱性蛋白质中去除LPS, 成本低, 吸附容量大。但不适合于溶液中存在其他带负电荷物质的情况。

(3) 类脂A是LPS的生物活性中心, 具有亲、疏水双性, 因此有双相萃取法:

Triton-114萃取:Triton-114是一种表面活性剂, 用其采用相分离法去除细胞色素C、过氧化氢酶以及血清白蛋白中的LPS, 有较好效果。但是有毒的萃取剂如Triton X-114易残留, 影响产品的性能。

可以试试用PBS洗几遍去除LPS

你要去除LPS，换个液不就好了？