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        WB实验中条带没有间隔的原因?

        相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

        user-title

        布天袋

        WB实验中所有条带连成一片没有间隔是什么原因造成的,如何解决呢?

        wx-share
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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        感觉是你上样浓度太大了,试试降低浓度。还可以降低抗体的浓度。没有间隔。主要是因为发光太强了。

        user-title

        未来9

        有帮助
        1.
        上样量过大 这里指的是质量数过大,一般上样在20-100ug之间就可以,楼主可以减半上样量,试试看。
        2.
        一抗孵育时间过长,适当缩短孵育时间,也可以改善。
        3.
        一抗浓度过大 ,抗体如果很好用的话,增大稀释比例试试。
        4.
        曝光时间过长
        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        可能是一抗浓度太高,导致抗体非特异性结合。需要 降低一抗浓度。

        洗膜的时间和次数不够,导致其他蛋白没有清洗干净提高洗脱时间和频率。

        封闭物用量不足。提高封闭物浓度,孵育时保证封闭液完全浸没转印膜。

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