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        ELISA实验如何尽量避免假阴性和假阳性?

        相关实验:标记抗体的应用技术

        user-title

        咩咩咩凹

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        4 个回答

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        引起 ELISA 测定错误结果的原因主要有:

        ①标本因素(类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等干扰)

        ②试剂因素(标本管中添加物质的影响)

        ③操作因素(标本溶血、标本受细菌污染、标本凝集不全、标本保存不当)

        user-title

        府宅

        有帮助

        假阴性

        ①标本用肝素或EDTA等抗凝处理,易造成HBsAg检测结果假阴性。肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷,能吸附酶标记物不易洗脱有关。EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中的辣根过氧化物酶活性,造成假阴性。

        ②采用双抗体夹心法测定抗原时,如果用一步法测定,而此时被测物浓度过高,则可能由于勾状效应导致检测结果为阴性。为避免这种情况可以对样本进行稀释,或者直接改用双抗体夹心两步法。

        ③样本内被测物的浓度较低,也易造成假阴性结果。比如某些疾病发展初期被检物浓度低于检测限。

        ④某些情况下,个别个体的基因突变也可能导致检测结果为假阴性。尤其是检测用抗体的结合位点在突变区的情况下,这种情况虽然极其罕见,但是也可能存在的。

        假阳性:

        假阳性的出现通常是样本中掺杂有同源或同工物质,例如类风湿因子、补体、交叉反应物质和其它物质等。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        在ELISA检测中为了避免出现假阴性或假阳性,不仅要严格执行标准操作规程,还要对与标本相关的各因素进行分析,采用对应措施排除干扰物质的干扰作用,做到检测结果准确一致。

        user-title

        txs900416

        有帮助

        一般elisa实验是通过设置复孔来避免假阴性和假阳性,此外,elisa时的标准曲线也是有力的阴性对照和阳性对照。

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