府宅
有些荧光杂点可能是非特异,建议检查一下封闭用的血清或者BSA是否有问题。
如果确信荧光杂点不是生物信号,可以利用photoshop,通过调节色阶、通道相减、调节明暗对比度等去掉,但前提是确保足够的信噪比。
如果找不到原因的话,还可以尝试将Caspase-3用红色标记,将NEnU用绿色标记,可能会有意想不到的结果。
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由于有些荧光二抗会产生沉淀或者杂质,所以加荧光二抗前高速离心一下,我用的是3000转x2min;有的说明书上标注的是20000转 20s。离心后只加上清。(效果很显著)
小布丁瑶瑶
杂质(游离的荧光素)吸附在细胞片上了(细胞片不平),只能加强洗涤了。
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