为什么做了两次免疫组化鉴定细胞都呈现的是黑色的？
丁香实验
为什么做了两次免疫组化鉴定细胞都呈现的是黑色的，文献上面都是棕褐色颗粒，一直在镜下观察也没看到棕褐色，显色到五分钟后观察是黑色的。是什么原因，应该怎么处理？
11 个回答
dxy_zutyknhe
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可能是没有进行固定和破膜，也要注意是不是贴片反了
lyang556
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抗体浓度和质量问题，组织切片本身问题，以及DAB孵育时间问题都会影像显色。
咸水鱼rain
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那你上显色液之后一直在镜下观察吗？有可能是抗体浓度太高，五分钟时间太长了
颜渊溪桥
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考虑抗体是否特异，显色液是否没问题，另外靶蛋白在细胞中表达是形成granule之类的复合体么。
CXCR3
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DAB显色一般敷育10分钟，的时候需要在显微镜下实时监控，达到理想染色程度的时候就需要立即终止反应。
sk1981521
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一个是优化抗体浓度，二是用H2O2灭活内源性酶
Timy最爱柠檬水
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苏木素染料没有洗干净，染料可能有沉渣，细胞dab染色时间过长
txs900416
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1是考虑抗体用多了，或者封闭不好；2是考虑显色液是不是降解失效了
peaceful13
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是不是黑色素瘤细胞的影响？最好确定一下样本，或者是不是试剂受污染了
西柚味的芋圆
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排除一下是不是DAB降解了，变成黑色。没封片的时候镜下看到的确认跟封片后镜下看到的颜色是不一样的，所以需要提前封片。
dxy_0mxazdaw
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没有洗干净，或者抗体浓度不合适。
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