关于小鼠肾脏冰冻切片直接免疫荧光问题2

冷丙酮固定10min.染色后-20保存，能放一个月，特别长时间的话，不然用石蜡？

一般是先保存～然后要染色的时候再加抗体染色，染完后的切片-20保存～一般一个月都还行

若长时间保存可丙酮固定后放在-20度保存，使用时再复温，按照正常步骤操作，封片时加抗淬灭剂封片，避光，4℃保存

冰冻切片不用固定，加入包埋计直接丢-80，要快速处理，抗体要放稀释液里加。

能灌注固定最好，条件有限，取材后先固定几个小时后再包埋切片也可以，当然样本少可以马上切片的也可以切片后固定10分钟。血细胞对荧光结果有时候会有影响，比如FITC，但影响有多大还得看组织和荧光素。 2：组织比较多的话可以先放固定液里，取完材后一起拿过去 3：荧光淬灭的还是比较快的，最好当时就观察。现在也有抗淬灭的封片剂卖，有一定的效果，但也只是延缓一下。所以不用想长期保存结果了，最好当时看了后拍照留存。放4度避光保存。固定后的组织一般放两三个月是没有问题的

制作过的冰冻切片如果没有染色可以放在-80℃保存，用丙酮固定后保存。染色之后封片可以保存在4℃，维持一个干燥环境，建议一天之内拍摄，超过一天的片子荧光会逐渐减弱。。

应严格密封保存，用铝箔或者塑料薄膜密封好，防止失水，丙酮添加的顺序影响不大。

固定后保存更长，加抗体后防止淬灭可放4度避光，一般一个月内都能看见

加过荧光抗体的样本也可以长时间保存的，可以加入抗淬灭剂封片，然后放到-20℃就可以长时间保存了