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科研学霸天团,48小时有问必答
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PCR产物量过少的原因是什么
whilt-shirt
有可能是引物特异性不强或者试剂有问题
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问
用EdU检测肝癌细胞的增殖一般孵育多久呀
天一湖医者
用EdU检测肝癌细胞的增殖一般孵育2小时
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问
裂红液过期了会有什么后果?
bamboopiggy
这应该不是裂红液的原因,可能你离心以后,沉淀重悬有问题
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问
铁死亡中用亚铁你们用的是什么呢?以及怎么配置的吖?
bamboopiggy
可以用硫酸亚铁铵来处理细胞,参考:Nano-targeted induction of dual ferroptotic mechanisms eradicates high-risk neuroblastoma 最大用到了600uM
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问
卵巢组织如何提取巨噬细胞?
bamboopiggy
将组织研磨成单细胞悬液,然后用CD68标记巨噬细胞M,φCD163标记M2,进行流式分选
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问
B16细胞黑色素含量测定
bamboopiggy
这个是因为你用碱溶MSH的问题,你试试调整一下配好溶液的PH值。
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问
如果想检测淋巴结或者脾脏的细胞因子,有什么合适的方法吗?
balalaLy
组织消化成单细胞流式检测蛋白表达切片免疫组织化学染色检测蛋白表达组织裂解提蛋白wb、elisa测蛋白提rna pcr检测
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问
JUNB和JUN有什么区别呢?
天一湖医者
Jun和JunB是AP-1家族成员,在T细胞发育中起重要作用,此外,JunB在干细胞中的失活导致骨髓增生紊乱,其特征是粒/巨噬细胞祖细胞(GMP)数量增加,Jun和JunB在功能上具有拮抗性和补偿性,强调Jun和JunB对某些靶基因的表达具有同等的调节作用。
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问
HT22细胞OGD模型
bamboopiggy
加cck8,不用换液啊,如果是怕药物和cck8相互作用,可以换液,cck8只对活细胞起作用,所以问题不大。至于你说的时间点,可能你细胞铺的variation就大。可以重复一下试试。
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问
求助:关于医学免疫学抗原的知识
Miracle星
根据抗原刺激机体产生抗体时是否需要Th细胞辅助而将抗原分成两类:胸腺依赖性抗原(thymus dependant antigen,TD-Ag)和胸腺非依赖性抗原(thymus independent antigen,TI-Ag)。TD-Ag是指在刺激机体B细胞产生抗体时需Th细胞辅助的抗原。B细胞通过BCR识别抗原的B细胞表位,内吞并将抗原降解成短肽,通过与MHC Ⅱ类分子结合,提呈给Th细胞识别
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问
细胞免疫荧光,目标蛋白是膜蛋白,可以不用triton 打孔么?
bamboopiggy
可以啊,只要能实现实验目的就好,不一定非要打孔
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问
膜蛋白abcam,说明书只有1个浓度1:50 。二抗1:1000 bioss 整个细胞都有染色不是只有膜上有,需要调整一抗浓度么
bamboopiggy
是,感觉你染的有点过了,降低一下一抗浓度试试。
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问
共聚焦40倍镜看dapi 整个细胞蓝色一片 没明显细胞核染色效果。目的蛋白是膜蛋白二抗是红色,也是红色一片没明显细胞膜结构,为什
汤姆卜丽波
是不是看错了,一点都没有么,如果有一点,那就是没染好
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问
实时荧光定量PCR扩人的线粒体基因设计引物 进行个体识别是不是要分段设计引物?
汤姆卜丽波
肯定要分段的,基因太长了,要针对每一段设计
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问
在Assay中选择Absolute Quantification后,溶解曲线怎么设置呢?
bamboopiggy
绝对定量是适合需要测定靶点实际拷贝数的研究人员采用 的实时荧光定量 PCR 分析方法。要进行绝对定量,需对 已知浓度的目标模板溶液进行几次连续稀释,采用实时荧 光定量 PCR 扩增,利用获得的数据生成标准曲线,标准 曲线以各靶点浓度及相应的 Ct 值绘制。然后将未知样本 的 Ct 值与此标准曲线进行比较,确定其拷贝数。而溶解曲线是看引物特不特异的,按照常用的方法设置就好。①快速升温至 95℃,将反
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问
image j的Fiji版本电脑使用不了是为什么?
天一湖医者
可能的原因是文件的路径包含中文名称
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问
细胞IF,共聚焦显微镜相同参数观察对照组实验组的细胞基本都染上颜色了 只是对照组的亮度明显比实验组暗,请问亮度区别如何统计学分析
bamboopiggy
你用的共聚焦的电脑上应该有数据处理的软件,读出灰度值,就可以。
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问
细胞IF 4片2组,1个对照组跟实验组对比结果是想要的 另1个对照组荧光强度跟实验组对比没太明显。需继续做还是说抗体没有明显表达
bamboopiggy
先确定你的抗体是好使的,找个阳参,否则不能说明你的蛋白没有明显表达
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问
养的DC细胞不贴壁,还有cd14+?
bamboopiggy
在第0天,对来源于一个白细胞单采术样本的细胞进 行铺板,挑选贴壁2小时的单核细胞。将没有贴壁的 细胞冲洗掉,贴壁的细胞在培养基中培养7天。在第5 天,将成熟化添加物分别加入到细胞(成熟的树突状 细胞)或者不加入到细胞(未成熟的树突状细胞)中 培养两天。通过流式细胞仪来测定未成熟及成熟的 树突状细胞中CD80、CD83和CD86的表达。在第7 天,细胞表达了成熟的树突状细胞标志物CD80、 CD83
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问
目的蛋白趋势是什么意思?什么是内参齐?
bamboopiggy
目的蛋白的趋势,比如说你的对照组比你的实验组的蛋白表达量少50%,但是你每次做wb,不可能是做的结果一摸一样,可能这次少50%,下次少40%,只要有少的这个趋势就可以。内参,因为wb是半定量的,需要一个同样样品中的,不容易改变的蛋白,作为上样量的参考,一般都是选的管家基因:如:actin,gapdh等。
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