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问
怎样包毛囊才能更好的切到毛囊的纵切?有什么切组织和包埋的技巧吗?
Dr_劉医生
建议用冰冻切片优先,切片前最好先用蔗糖溶液浸泡,以防止冰晶的产生,而且降温的速度宜快,能使标本的温度与低温箱的温度相同(标本温度过热切片组织易被挤压,组织结构重叠;温度太低时,切片组织易脆裂)。此外,切片时先将样品台上的OCT修出平台,放置毛囊时应注意使毛囊球部朝向刀口,这样才有利于获得纵剖面。速度不能过快,不然容易厚度不均匀,而且毛干和组织鞘分离,破坏结构。
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问
免疫荧光切片是否可以用流式抗体染色?
Eason老歌迷
流式抗体比较容易淬灭。做免疫荧光的话,在同等条件下,当然选择做荧光抗体啦,但实在没有,流式抗体还是可以用的,不过最好马上去荧光显微镜下看结果,时间长了不是很好。我用过流式抗体做荧光染色,效果还可以。
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问
流式细胞仪胞内因子染色
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问
多重免疫荧光出现通道串色的情况,如何降低串色跟非特异性荧光着色!
陈皮712
1. 选择波长差异较大的染料;2. 在仪器上调好校正,或者在流式相关软件上进行调整(如flowjo的校正矩阵);3.关于非特异性着色,首先细胞跟抗体孵育后,充分用PBS清洗,并选择着色特异性较好的抗体品牌,必要时染完一种色后进行封闭处理。
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问
有淋巴细胞做抗原实验
此用户已注销
可以参考文献Guidelines for the survival bleeding of mice and rats.(2010).
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问
多糖的免疫调节活性,有几点问题?
Eason老歌迷
你就可以参看这篇文献,这个综述讲的很详细。“分子修饰对多糖免疫活性影响的研究进展”分享给你。
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问
石蜡包埋,蜡块出现裂纹
Eason老歌迷
可能是你的蜡的韧性不好。你可以加少量的蜜蜡;或者将一般石蜡反复融解、凝固,直到蜡由白色变成微黄色为止。处理好的蜡有韧性,在漂片时可以抻得很舒展,那些微小的皱褶几乎都能打开。
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问
电融合失败的细胞还可以进行手动融合吗,电融合会不会对细胞产生影响?
Eason老歌迷
电融合失败的细胞还可以进行手动融合,电融合会对细胞产生影响,但是你只要操作得当,并没有太大影响。
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问
求助🆘 有无大神讲解一下大鼠巨噬细胞抗体抗体ED1和ED2
Eason老歌迷
你查了这四种抗体的说明书吗?看文献里它们用什么抗体比较多呢?我觉得ED1和ED2,可以用CD68,CD163代替。ED1和ED2在做大鼠三叉神经冰冻切片免疫荧光时需要破膜通透处理。ED1是表示总的巨噬细胞。ED2是表示组织驻留型巨噬细胞。
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问
内皮细胞Cd31免疫组化染色
Eason老歌迷
石蜡切片脱蜡至水。3%H2O2室温孵育5~10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。蒸馏水冲洗,PBS 浸泡5 分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。5~10%正常山羊血清(PBS 稀释)封闭,室温孵育10 分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2 小时或4℃过夜。PBS 冲洗,5 分钟×3 次。滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS 稀释),
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问
免疫组化结果
申东熙老伯
可以试着提高一抗浓度,加长染色时间。
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问
LTBR阻滞剂
Dr_劉医生
竞争性结合位点,一个抗原抗体结合,一个补体途径结合,应该通路,比如SSSLTBR-IgBaminercept阻断LTa1b2和LIGHT信号通路原发性干燥综合征
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问
agonistic mAb和普通单克隆抗体的区别
朱芮reda
可以混用,一个单抗,一个单抗抑制剂
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问
【求助】PBMC培养污染?
此用户已注销
培养基白色絮状物是在培养基配制完成后没有及时包扎灭菌,是微生物作用所致,也是培养基不同成分之间发生反应所致。总之,培养基配制过程中就需要打开灭菌锅了,尽快灭菌,就不会有白色絮状沉淀了。
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问
涂菌12小时后,细菌成一片,原因为何
慈悲为怀医德为镜
有可能是浓度太高了,建议稀释一下试试
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问
石蜡切片的制备过程中昆虫组织切不下来?
你好几和户
自己感觉可以检查下切片机的零件是否旋紧,切片是用力要适当,不可过猛,而且现在是夏季,石蜡容易软化,可用冰块冷却。
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问
免疫荧光实验出现杂点?
junyong151
常见的原因其他老师都提到了,还有一点就要考虑一下自己所用的洗片子的溶液是否有结晶等东西造成了这种非特异性的染色,我们可以过滤一下溶液,看看是否可以去除这些杂质。
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问
求助:免疫荧光实验出现结晶的物质?
bamboopiggy
检查一下你的盖玻片有没有特别脏,还有就是你拿什么封的片?
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问
关于大鼠软骨细胞的II型胶原免疫组织化学染色问题?
此用户已注销
免疫荧光染色出不来,有可能是一抗的问题。
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问
组合免疫检查点疗法可以通过增强代谢适应性来改善抗肿瘤效果吗
junyong151
通过靶向特定免疫抑制代谢物和细胞因子,可能会逆转T细胞功能抑制,增加T细胞抗肿瘤活性,最终提高免疫检查点抑制剂的疗效。
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