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        小鼠粪便移植

        相关实验:粪便标本处理试验

        user-title

        学着用心

        各位大佬,有了解小鼠粪便移植方法的吗?急急急!!!

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        收集新鲜粪便样本,并尽可能在室温下快速处理。

        使用无菌取粪器取得一定量的粪便样本,并转移至无菌离心管中。

        将离心管离心,去除上清液,保留细胞沉淀。

        加入等体积的保护液(如10%甘油,20%甘露醇等),缓慢混匀,将混合液分装至无菌冻存管中。将冻存液融化然后把过滤得到的微生物通过灌胃针喂给小鼠

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        粪便移植步骤:

        1.按照物品无菌传递要求,将密封装有菌液样品的离心管传递进入隔离器内。


        2.提前将8号或10号小鼠灌胃针和1mL注射器经高温高压灭菌后,按照物品无菌传递要求传入无菌隔离器内。


        3.用1mL注射器吸取菌液,将灌胃针与注射器相匹配,详细操作见视频1。


        4.打开笼盖,用右手拇指和食指提起小鼠尾巴中部,并将小鼠放置在笼盖上。


        5.称量小鼠体重,根据小鼠体重进行灌胃,灌胃量约为10μL/g。以每只无菌小鼠体重平均20g为例,小鼠灌胃的体积约200μL,菌量约2×107-2×108cfu。每次使用仅打开一次,未用完丢弃。


        6.用左手拇指和食指第一、二指节抓住无菌小鼠耳后的颈部皮肤将其拎起,用无名指和小指夹其背部皮肤和尾部将其固定,同时应防止动物窒息。使其头、颈和身体呈直线。


        7.灌胃针头从动物嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有刺空感。


        8.将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,回抽注射器无空气逆流方可注入菌液。


        9.观察动物的反应,如无过度挣扎,可尝试推注,如阻力较小可推注所有药物,如阻力过大或动物反应剧烈,呼吸受阻,可缓解后再进行灌胃操作。


        10.松开动物,观察动物呼吸,如无呼吸异常,可确定灌胃成功。


        11.为提高微生物移植效果,可用等量菌液对小鼠下腹部和背部皮肤进行涂抹(以皮肤被毛浸湿为准),小鼠可通过自身或相互舔舐摄取菌群;对于未断奶仔鼠的微生物移植,可在母鼠乳头部位涂抹菌液。

        user-title

        于小鱼鱼1998

        有帮助

        移植方法:微生物样品经过处理后,通过灌胃的方法,将微生物由小鼠口腔直接注入到小鼠胃中,使其在小鼠肠道定植,从而实现无菌小鼠肠道微生物移植,研究微生物在无菌小鼠的功能和作用机制等。


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