• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        质粒转染遇到的几个问题

        相关实验:质粒转化大肠杆菌

        user-title

        科研饼干

        最近在学着构质粒,遇到几个问题想问一下各位大佬

        1.构建慢病毒稳转质粒能不能拿来做瞬转

        2.为什么找公司构建了sh的稳转拿来做了瞬转预实验以后wb和pcr都没有显示敲低成功

        3.质粒构建过程中的点突变或移码突变问题怎么解决。

        感谢各位大佬的帮助

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1.慢病毒的质粒不能作瞬转,因为包慢病毒还需要几个包装质粒。

        2,原因同1.

        3,扔掉,重新作,一般作慢病毒的shRNA的序列都是公司直接合成的,除非是合成有问题,否则不会出现突变。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        慢病毒质粒做瞬转应该可以的,我见过先用一个慢病毒做好稳转细胞系,再用另一个慢病毒继续转染做稳转细胞系,即这个细胞里经历了两次病毒感染,是血液专业的悬浮细胞系。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        稳转质粒可以做瞬转,瞬转后敲低效果低应该是转染不成功。或者是质粒不行,需要重新设计引物构建shRNA。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序