红色荧光蛋白质粒转hek293t不亮怎么办
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质粒用的是碧云天pCMV–C-DsRed，基因大小七百多，测序正确，且质粒dsred自带atg。
用碧云天lipo8000转染
48h后染色，空载红色荧光有一点点点，重组载体基本没有，用细胞爬片，红光亮度90％，40X也看不见。但是dapi染很好，绿色荧光蛋白也很亮，细胞也没有叠在一起。
除了是质粒提取纯度问题影响转染还会有哪儿踩坑了呢？
求大神救救孩子
4 个回答
bamboopiggy
有帮助
可能是你质粒构建有问题，尤其是diRed，容易产生移码，先检查质粒，如果没有问题，可以进行流式分选后，再做。
汤姆卜丽波
有帮助
可能还是转染没转上，先试试转个细菌拍一下有没有信号，再转293
balalaLy
有帮助
转染试剂或者细胞状态不好也会影响转染效率
天一湖医者
有帮助
可能是padtrack-cmv上一个表达信号出了问题，建议重新试一下
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