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吉满生物
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慢病毒包装服务
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慢病毒简介
慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体，属于逆转录病毒科，为RNA病毒。区别于一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。目前慢病毒也被广泛地应用于表达RNAi的研究中。由于体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的，因而使其应用受到较大的限制。基于慢病毒载体设计的shRNA，转移到细胞内转录siRNA的策略，不但使有效转染的细胞种类增加，而且长期稳定抑制目的基因在细胞中表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型细胞，从而达到良好的基因治疗效果，具有广阔的应用前景。
吉满生物慢病毒包装服务
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过表达慢病毒包装
shRNA慢病毒
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文献和实验【1】IF-41.443 Jin S F,Li M Y,Chang H Y,et al. The m6A demethylase ALKBH5 promotes tumor progression by inhibiting RIG-I expression and interferon alpha production through the IKKε/TBK1/IRF3 pathway in head and neck squamous cell carcinoma[J]. Molecular Cancer, 2022, 21(1):1-19.
【2】IF=41.443 Zhang L X,Gao J,Long X,et al. The circular RNA circHMGB2 drives immunosuppression and anti-PD-1 resistance in lung adenocarcinomas and squamous cell carcinomas via the miR-181a-5p/CARM1 axis[J]. Molecular Cancer, 2022, 21(1):1-20.
【3】IF=41.443 Chen S W,Zhu S Q, Pei X,et al. Cancer cell-derived exosomal circUSP7 induces CD8 + T cell dysfunction and anti-PD1 resistance by regulating the miR-934/SHP2 axis in NSCLC[J]. Molecular cancer, 2021;20(1):144.
【4】IF=23.177 Xia A X,Yuan W W,Wang Q,et al. The cancer-testis IncRNA Inc-CTHCC promotes hepatocellular carcinogenesis by binding hnRNP K and activating YAP1 transcription[J]. Nature cancer. 2022(3-2).
【5】IF=17.521 Han D W,Wang L J,Long L,et al. The E3 Ligase TRIM4 Facilitates SET Ubiquitin-Mediated Degradation to Enhance ER-α Action in Breast Cancer[J]. Advanced Science,2022;9(25).
【6】IF=17.521 Wang L L,Shen Q,Liao H Z,et al. Multi Arm PEG/Peptidomimetic Conjugate Inhibitors of DR6/APP Interaction Block Hematogenous Tumor Cell Extravasation[J]. Advanced Science, 2021;8(11).
【7】IF=17.521 Liu Q D, Sheng Z H, Cheng C,et al. Anesthetic Propofol Promotes Tumor Metastasis in Lungs via GABAA R-Dependent TRIM21 Modulation of Src Expression.[J]. Advanced Science,.2021;8(18)
【8】IF=16.873 Lin S,Yin S,Shi J F,et al. Orchestration of energy metabolism and osteogenesis by Mg2+ facilitates low-dose BMP-2-driven regeneration[J]. Bioact Mater. 2022;18:116-127.
【9】IF=15.304 Wang F,Qian J,Yang M Y,et al. MiR-6924-5p-rich exosomes derived from genetically modified Scleraxis-overexpressing PDGFRα(+) BMMSCs as novel nanotherapeutics for treating osteolysis during tendon-bone healing and improving healing strength[J]. Biomaterials, 2021, 279:121242.
【10】IF=15.282 Ju H Y, Hu Z R, Wei L D,et al. A novel intronic circular RNA, circGNG7, inhibits head and neck squamous cell carcinoma progression by blocking the phosphorylation of heat shock protein 27 at Ser78 and Ser82[J]. Cancer Communications, 2021;41(11):1152-1172.
【11】IF=12.658 Zhu M X,Zhang P F,Yu S,et al. Targeting ZFP64/GAL-1 axis promotes therapeutic effect of nab-paclitaxel and reverses immunosuppressive microenvironment in gastric cancer[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2022, 41(1):1-20
【12】IF=12.658 Zhu J J,Cai T T,Zhou J Q,et al. CD151 drives cancer progression depending on integrin α3β1 through EGFR signaling in non-small cell lung cancer[J]. Journal of experimental & clinical cancer research , 2021;40(1):192.
特异性更高。您可以根据实验设计需要进行选择。 2、慢病毒包装载体：Cas9 慢病毒表达载体采用 3 质粒慢病毒系统。您可使用我公司的 pH1、pH2；addgene 载体 psPAX2、pMD2.G 或者 pCMV-dR8.2 dvpr、pCMV-VSVG 均可包装成功。 3、无内毒素质粒提取试剂盒。使用质量可靠的质粒提取试剂盒可以提供更高的转染效率和病毒包装效率。我们采用 Qiagen 的 Plasmid Plus 系列产品可以取得满意的包装效果。 4、转染
目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面： 细胞基因治疗（截止目前，已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因） 基因表达调控（过表达、RNA 干扰研究等） 基因编辑（CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制） 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1：用慢病毒载体进行基因过表达，构建稳转细胞株，研究葡萄糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用[1] 细胞
分为五步，即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制（小于300个基因），我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计，保证每个基因设计3个不同的gRNA，最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体，单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因，双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA，cas9蛋白则由单独
