慢病毒包装/LV/病毒包装

概述

慢病毒载体（Lentivirus vectors）的特性：在非分裂和分裂细胞中稳定整合、转基因的长期表达、低免疫原性，使其成为基因治疗的理想基因转移载体。转基因可以在非分裂或终末分化的非常静止的细胞（例如神经元）中实现。我们的慢病毒载体来源于HIV-1病毒，序列经过精心优化，提高了生物安全性、基因表达水平和病毒转导效率。慢病毒颗粒通常是在包装细胞中共表达病毒体包装元件和载体基因组来产生的。
 

我们开发出了一系列专有技术和试剂从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面提升了慢病毒包装工艺水平。除了科研级别的慢病毒外，我们还提供GMP级别的慢病毒制备服务。
 

订购信息

第三代慢病毒




第二代慢病毒





非整合慢病毒

病毒类型
 

• VSV-G假病毒化的第三代慢病毒（默认）
• VSV-G假病毒化的第二代慢病毒
• 非整合慢病毒
• 使用其他膜蛋白进行假病毒化的慢病毒（如使用冠状病毒刺突蛋白）
• 无膜蛋白的表面光秃的慢病毒（可用于转导时的阴性对照）

滴度保证
 

我们的滴度保证仅适用于这样的转移载体

• 载体上的慢病毒基因组（从5’ LTR的R元件的第一个碱基到3’ LTR的R元件的最后一个碱基）长度小于承载限度长度9.2 kb（～野生型HIV-1基因组长度）。超过该范围，载体上的病毒基因组也许会被包装进病毒，但会造成病毒滴度降低。

对于如下这样的转移载体，我们不能保证滴度：

• 包含对包装过程有不利影响的序列，例如毒性基因（如促凋亡基因、针对HIV的host factors）；破坏包装细胞完整性的基因（如导致细胞聚集的膜蛋白）、破坏慢病毒RNA基因组完整性的序列（如含有polyA信号序列）、易于重排或者产生二级结构的序列（如重复序列或者高GC含量序列）。
• 用户提供的载体，因为我们无法控制载体质量。

交付内容



对照病毒

为了更好地开展您的实验，我们按照“对照病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您赠送或者推荐对照病毒。例如，如果定制病毒表达一个基因，则推荐的对照病毒表达荧光蛋白EGFP。如果定制病毒表达打靶某个基因的shRNA，则对照病毒表达一个Scramble shRNA。推荐的对照病毒信息如下表所示：




辅助病毒

为了更好地开展您的实验，我们按照“辅助病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您推荐辅助病毒。例如，如果定制病毒是一个只含TRE启动子的TetOn慢病毒，则需要一个表达rtTA的辅助病毒，才能进行诱导表达实验。推荐的辅助病毒信息如下表所示：

生产/质控

 

 

注意：第三代慢病毒包装系统只能包装第三代的慢病毒转移载体。但是第二代慢病毒包装系统既能包装第二代，也能包装第三代的慢病毒转移载体。第三代慢病毒转移载体上的5’ LTR中的U3元件是被一个外源启动子替代（如CMV启动子或者RSV启动子），使其不依赖Tat蛋白进行HIV RNA基因组的转录，故第三代慢病毒包装系统的包装质粒不含Tat蛋白。第二代慢病毒转移载体上的5’ LTR是野生型的LTR，含有U3、R和U5元件，依赖Tat蛋白转录HIV RNA基因组，故第二代慢病毒包装系统的包装质粒含有Tat蛋白。