土井挞克树
模糊考虑是电压太低了,建议提高电压之后再跑
dxyc42u
可以增加一下曝光时间试一试吧。
sswei
条带模糊可能有两种原因:
1。电泳电压过低,导致蛋白泳动速度过低而弥散。过程要注意观察电流。因为泳动其实还是靠电流的,有时候相同的电压情况下由于电泳液的问题而导致电流偏低而产生弥散。
2。转膜的时候夹心没有夹紧而导致部分蛋白弥散转印。
loveliufudan
如果你在免疫印迹(Western blotting)实验中观察到条带模糊,可能有以下几个常见的原因:
1. 蛋白负荷过多:过多的蛋白负荷可以导致条带变得模糊不清。在准备样品时,确保在适当的蛋白负荷范围内加载样品。如果需要加载较高的蛋白负荷,请调整凝胶浓度和电泳条件以适应较大的蛋白负荷。
2. 不适当的电泳条件:电泳条件对于获得清晰的条带非常重要。如果电流设置过高,电泳时间过长,或者缓冲液的离子浓度不正确,都可能导致条带模糊。确保使用正确的电泳缓冲液和适当的电流和时间来进行电泳。
3. 过度传递:如果电泳转移的时间过长或电流设置过高,蛋白质可能会过度转移到膜上,导致条带模糊。优化转移条件,包括转移时间、电流和缓冲液的组成,以确保适当的蛋白转移。
4. 膜处理问题:条带模糊也可能与膜处理有关。如果膜的湿润不均匀、膜与凝胶的接触不良或膜上存在污染物等问题,都可能导致模糊的条带。确保膜与凝胶紧密接触,并进行适当的膜湿润和洗涤步骤。
5. 抗体问题:抗体的选择和质量也可能对条带的清晰度产生影响。确保使用高质量的抗体,并根据建议的条件进行免疫反应和洗涤步骤。
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