免疫共沉淀-样品制备 哪些步骤是可以灵活调整的，比如哪一步可以暂停一下？

一般建议尽快裂解，负八十度保存不要超过三个月，时间太长会造成蛋白降解

免疫共沉淀（Co-IP）实验中，样品制备的步骤包括裂解细胞，去除细胞碎片和未被裂解的细胞，以及准备含抗体的珠子等。这些步骤的灵活性不同，具体可调整的程度也不同。下面是一些可以灵活调整的步骤：

细胞裂解：可以根据实验需要和样品特性选择合适的细胞裂解方法和裂解液。对于一些样品，可以将裂解后的细胞冻存，等到需要的时候再进行下一步操作。但是需要注意的是，冻存后的样品可能会影响到某些共沉淀实验的准确性。

样品预处理：有些共沉淀实验需要预处理样品，比如去除核酸或其他成分。这些步骤可以根据实验需要进行灵活调整，但是需要注意不要影响到实验结果的准确性。

抗体选择和结合：抗体选择和结合是共沉淀实验中非常关键的一步。可以根据实验目的和样品特性选择合适的抗体和珠子，而且可以调整抗体和珠子的比例和用量。

总的来说，免疫共沉淀实验中的每一个步骤都非常重要，但是有些步骤可以灵活调整。需要根据实验目的和样品特性进行优化和选择。例如，如果实验中需要收集大量的细胞，可以先将细胞冻存，等到需要的时候再进行细胞裂解；如果实验中需要去除核酸，可以根据样品的特性和实验目的选择合适的方法。需要注意的是，每一步操作都可能影响到共沉淀实验的准确性，因此需要仔细考虑每一个步骤的影响。

对于Co-IP，由于某些蛋白质在反复冻融中会丧失其天然结构，破坏蛋白质-蛋白质间的相互作用，因此建议在进行Co-IP时使用新鲜的裂解液样本。如有特殊情况也可以将样本短暂冻存于液氮或-80℃环境中。