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免疫共沉淀实验,用裂解液裂解细胞后的液体非常粘稠,离心后也非常粘稠,用2.5微升枪头也没办法吸取上清,怎么办?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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dxy_p4luxqt9


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3 个回答

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土井挞克树

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建议增加裂解时间,或者增加一种裂解酶。

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loveliufudan

有帮助

如果进行免疫共沉淀实验时,裂解液非常粘稠,可能是因为细胞裂解不彻底或者存在大量的DNA或RNA等高分子物质,导致样品粘稠。这种情况下,可以尝试以下几种方法:

1.调整细胞裂解条件:可以尝试更改裂解液的pH值、NaCl浓度、甘油浓度、Triton X-100浓度、EDTA浓度等条件,以优化细胞裂解效果。如果使用冷冻切割法等机械方法裂解细胞,则需要对样品制备过程进行优化。

2.增加离心时间或速度:可以将样品离心时间或速度增加,以使高分子物质沉淀到底部,上清变得更加清晰。

3.使用更细的过滤器:如果上清液中存在较多杂质或大分子物质,则可以使用更细的过滤器,如0.22微米的滤器,将样品过滤后再进行吸取。

4.使用更精细的吸头:可以使用更细的吸头,如1微升的吸头,将样品吸取到新的离心管中,避免样品残留在原有的离心管中。

需要注意的是,在进行免疫共沉淀实验前,应该对细胞裂解条件进行优化,并进行充分的离心和过滤操作,以避免实验结果的偏差。

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balalaLy

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粘稠的物质是核酸成分,可以通过以下方法可以减少粘稠:选择较为温和的裂解液,适当增加裂解液的量

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