慢病毒感染THP1怎么做？

你好，请问你后来解决这个问题了吗？我最近在做THP1的慢病毒感染，一加病毒细胞就贴壁了。试了好几次都这样，求救。

以下是一些建议，以改善感染效果：

调整MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）：尝试使用不同的MOI对THP-1细胞进行感染，以确定最佳感染效果。在实验初期，可以进行MOI梯度实验，以观察细胞在不同MOI下的生长和感染效果。选择最佳感染效果且对细胞生长影响最小的MOI进行后续实验。

使用增强感染试剂：可以使用一些增强感染试剂（如Polybrene）来提高感染效率。请注意，使用增强感染试剂时需要注意浓度的选择，以防对细胞产生毒性。

调整病毒接触时间：增加病毒与细胞接触的时间，以提高感染效率。通常情况下，慢病毒感染时间为4-8小时，但可以尝试将感染时间延长至12小时或更长时间，以观察感染效果的变化。

改变培养条件：对于贴壁和抱团问题，可以尝试改变培养条件。添加更多的培养基，以减少细胞间的接触，从而降低细胞贴壁和抱团现象。另外，可以使用非粘附的培养容器，以防止细胞贴壁。

适当使用离心：感染过程中，轻轻离心以促进细胞与病毒的接触。但请注意，离心过程中应使用适当的离心速度和时间，以防止对细胞造成损伤。

检查病毒包装和滴度：确保病毒包装和滴度合适。使用低滴度的病毒可能导致感染效率低。此外，检查病毒在储存和运输过程中是否遭受损失。

优化荧光检测时间：感染后，细胞可能需要一定的时间来表达荧光蛋白。请尝试在不同的时间点检测荧光信号，以确定最佳检测时间。

慢病毒会对THP1细胞造成一定的毒性，不同细胞对毒性的耐受力不同。建议调整并降低感染时使用的 MOl 值，即可在细胞准备时增加铺板细胞的融合率（可提高至 70%），调整感染时加入的病毒量。此外，还可选择在感染 4 小时后换液，用新鲜的完全培养液继续培养观察。