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        慢病毒感染巨噬细胞没有荧光怎么办?

        相关实验:慢病毒包装实验

        user-title

        z流沙z

        慢病毒感染其他细胞可以,但感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,一点荧光都没有,怎么弄?

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        2 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        感染巨噬细胞没有荧光首先建议提高病毒滴度进行感染,然后延长感染时间再做荧光检测

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可以尝试以下方法:

        优化MOI(Multiplicity of Infection,感染倍数):不同的细胞类型可能需要不同的MOI。针对RAW264.7细胞,进行MOI梯度实验以确定最佳感染效果和细胞生长影响最小的MOI。

        使用增强感染试剂:在感染过程中添加增强感染试剂,如Polybrene,可以提高感染效率。请注意选择适当的浓度,避免对细胞产生毒性。

        调整病毒接触时间:增加病毒与细胞接触的时间。通常,慢病毒感染时间为4-8小时,但您可以尝试延长感染时间至12小时或更长,以观察感染效果的变化。

        改变培养条件:确保RAW264.7细胞在感染过程中处于最佳生长状态。尝试在感染过程中降低血清浓度(如10%到5%),因为较高的血清浓度可能抑制病毒感染。

        病毒包装和滴度:检查慢病毒的包装和滴度,以确保感染效率。使用高滴度病毒以提高感染效率,并确保病毒在储存和运输过程中未受损。

        优化荧光检测时间:感染后,细胞可能需要一定的时间来表达荧光蛋白。尝试在不同的时间点(如48小时、72小时或96小时)检测荧光信号,以确定最佳检测时间。

        传代RAW264.7细胞:确保在感染过程中使用的RAW264.7细胞处于良好的生长状态,避免使用过度传代的细胞。

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