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        【求助】甲醇破坏抗原抗体结合的原理

        相关实验:酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

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        菜鸟初入大观园

        各位大佬,最近在做免疫亲和层析柱,但是90%甲醇洗脱效果很差,遂想用纯甲醇洗脱,不太明白甲醇或者乙腈破坏抗原抗体结合的原理,望赐教!

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        2 个回答

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        loveliufudan

        有帮助

        免疫亲和层析柱的洗脱液通常会使用一些有机溶剂(如甲醇、乙腈等)来破坏抗原和抗体之间的非共价键结合,以实现对目标蛋白的洗脱。在甲醇和乙腈中,甲醇的极性较低,通常比乙腈更强地破坏非共价键的稳定性。同时,甲醇也更容易从水相中除去,因此它通常被用作免疫亲和层析柱的洗脱液。

        然而,在使用高浓度甲醇(如90%甲醇)洗脱时,由于甲醇的极性较低,容易造成蛋白质和抗体的表面结构变化,进而破坏它们之间的相互作用力和结合能力。这种情况下,可能会导致洗脱效果不佳,或者对抗原-抗体的结合力造成一定的影响。因此,建议在洗脱前进行一定的优化和验证,并根据实验结果选择合适的洗脱条件。

        总之,在洗脱时要避免使用过高浓度的甲醇,可以尝试使用更低浓度的甲醇或者其他洗脱液来实现对目标蛋白的高效洗脱。

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        土井挞克树

        有帮助

        把亚甲基桥打断,暴露抗原表位。

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