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        酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

        相关实验:酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        试剂、试剂盒

        步骤

        材料

        盐酸(高纯;如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)

        丙酮(高纯;如 Aldrich 的金标级)

        甲醇(高纯;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)

        操作程序

        本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecular Biology —书改进而成的

        1) 配制酸化丙酮:

        丙酮                     120 ml

        HCl                       10ul

        混合,制成1mmol/L 溶液。

        2) 配制沉淀剂:将等体积的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷冻。

        3) 真空离心,将蛋白质溶液浓缩至少于 0.1 ml。

        4) 加入过 5 倍量(按体积)的沉淀剂于蛋白质水溶液。彻底混匀,在-20℃ 冰箱中孵育过夜。

        5)4°C 下,用微型离心机的以最高转速离心 30 min。

        6) 用精细的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通风橱中,用氮气吹 1h,至干。

        来源:丁香实验

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