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        关于用甲醇固定的细胞如何洗脱下来测吸光度

        相关实验:酸化丙酮/甲醇沉淀法实验

        user-title

        dxy_cev40hdw

        细胞用甲醇固定然后结晶紫染色,现在我想把细胞洗脱下来测吸光度请问大家用什么洗脱的。我用胰酶dmso洗过都洗不下来

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        6 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        甲醇固定的细胞经过结晶紫染色后,如果需要洗脱下来进行吸光度测量,可以尝试使用以下方法:

        1.高温洗脱:将细胞在高温条件下洗脱,如使用70-90℃的热水或高温染色槽。

        2.使用酶解液:将细胞用蛋白酶液(如 trypsin)解液处理,使用酶解液可以分解细胞结晶紫染色。

        3.使用酸洗脱法:将细胞用酸性溶液(如 0.1-1 M HCl或 0.1-1 M H2SO4)洗脱,酸性溶液可以分解细胞结晶紫染色。

        建议在洗脱时多次洗脱,并且在洗脱过程中加入适量的盐水或PBS,避免细胞脱水,同时可以用吸光度的方法确认是否洗脱干净。

        另外在酶解液或酸洗脱法中,洗脱时间和温度是很重要的参数,建议根据细胞类型和结晶紫染色种类进行调整。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        可以用NAD+进行洗脱。或用特异性洗脱。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可以试试用刮刀直接刮,但是你这样做还奇怪,你的实验目的是什么呢?

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        用dmso洗脱,如果你结晶紫染的时间长浓度高会比较难洗脱,需要延长洗脱时间到1-2小时甚至更长

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以尝试添加pbs洗脱,复合洗脱酶

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