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        泛素化实验问题——泛素化条带不均匀

        相关实验:蛋白质泛素化分析

        user-title

        伊童RW

        实验求助:做泛素化实验次数很多,但条带总是不稳定,我是转染HA-Ub,孵HA抗体显示泛素化。有时候一条里是均匀的,但有时候条带看上去一片一片的深浅不一,换了转膜的膜也还是有这样的问题。转膜的操作一直都是一样的,孵条带就没问题,底物都能正常孵出来,而且不存在这样缺失的问题。究竟是为什么啊?好绝望!求大神鼎力相助!

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        3 个回答

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        灵枢天问

        有帮助

        这看起来像是显影剂没铺上或者转膜没转到

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        你这个单一条条带是一片的,可能是胶的问题,可以换梯度胶试一下,我以前也是换用梯度胶跑的话会很好看。其次是曝光的膜上白色的部分像是有一个光圈的样子,好不好是显影机子的问题

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        感觉前两个图是转膜没转好。最后一个图,看着还可以。

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