CO-IP实验中，IGg组有条带，IP抗体是兔源的，WB抗体是鼠源的，二抗是经过预吸附处理的二抗。

样品被蛋白酶降解，处理方法：添加蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)；所有操作保持4℃以下冰上操作并防止冻融。

抗体浓度太低，处理方法：调整IP和/或IB抗体浓度， 必要时设立浓度梯度，摸索最佳浓度；

抗体亲合力太低，处理方法：选用适合于IP和/或IB的相应抗体；

IP抗体未与agarose珠子结合，处理方法：选用适合于IP的相应珠子， 正确保存防止变质或干燥；

Tag未暴露在融合蛋白构象的表面，处理方法：改变tag融合表达部位；

裂解液严谨度太高，处理方法：改用低严谨度裂解液。

神之迷惑，你那条带是IgG的啊？我猜，你的目的蛋白大概的大小是55，所以和抗体的重链大小差不多，所以IgG会显出来，这个没啥好改进的方法。

1. 先看下Co-IP的原理吧
2. IGg要求与IP的抗体种属来源一致，你看下是否一致。如果不一致必须更换；如果一致，那你就调整洗脱液吧

上样量有点没控制好，条带有点弥散。你的胶二条带好像是转膜没转好。