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        Western-blot实验制胶时好多泡泡怎么办?

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        ksclxn_456

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        8 个回答

        user-title

        cccym881

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        1. 板子要干净,用前洗一下尽量烘干
        2. 混匀后可以去超声一分钟
        3. 加的时候,尤其5ml枪头加分离胶避免产生小气泡
        4. 下面的胶垫润湿,胶垫太旧也会有影响,里面容易有气
        5. 加完分离胶后就不要在桌子上墩一墩板子和架子,容易把胶垫里的气泡磕出来,所以胶垫太旧也不好
        user-title

        VisionPanMMCS

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        如果制胶的过程没有问题,可能是胶板用的时间久了,密封性不好

        user-title

        dxy_h96fmgnq

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        你多配一点,然后吸的时候吸取澄清部分就行

        user-title

        李金喜

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        1)首先,玻璃板一定要洗干净,用洗洁净洗,冲干净后再用双蒸水冲一,晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分,混匀的时候用手轻轻摇匀,如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。

        2)配胶时混匀要轻,尽量不产生气泡,上胶时要快,枪也不打到底。加完分离胶后用双蒸水封,待其凝固。即使在上胶时液面上有气泡,加水后也会浮上来。分离胶凝好后,倒掉里面的水,用吸水纸吸干,再加浓缩胶,迅速插梳子。

        3)倒胶的时候,用1ml的枪沿一侧缓缓加入,不要打到头,以免带入气泡!

        4)将胶在小烧杯里配好后,将电泳槽略微倾斜,将烧杯的嘴靠在玻璃边缘,直接倒进去,速度快,而且不容易产生气泡,不妨试试

        5)用双蒸水封时建议用200ul的枪加水,这样压力小,以免把胶冲起来!

        6)国产的只能是缓慢加样,别把气泡加进去。如果加进去了,小心把整个板在桌上敲敲可以让气泡浮上来。

        7)分离胶中的气泡与插梳子有关,垂直插容易产生气泡,且不容意排除。将梳子倾斜5-10度插入,即使产生气泡也可以也可以通过轻轻晃动梳子使气泡从一侧逸出。

        user-title

        天一湖医者

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        我认为你还是可能在灌胶前摇或吹打不适在胶中产生气泡,建议用手轻轻旋转摇匀;还有一种情况可能是你用1ml加胶,不熟练就加胶比较慢,加胶过程中就开始凝,容易产生气泡,这时建议你用3ml加,每次不等推完,就重取凝胶,试试看。

        user-title

        dxy_bz95m657

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        1.使用移液器轻柔点

        2.SDS的量是否过多?

        user-title

        whilt-shirt

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        有可能是加完TEMED后耽误时间过长或者玻璃板没洗干净导致的

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        申东熙老伯

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        制备胶的时候如果有很多气泡建议稍微静置一会,板与胶之间有泡泡也可能是温度太高,可以在室温低一些的地方制备。

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