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        凝胶过滤层析相关的问题

        相关实验:蛋白质的层析纯化

        user-title

        dxy_h9snbtq9

        凝胶过滤层析分离蛋白质时,仪器上出现的峰特别多,无法分辨目标蛋白,原因是什么

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        6 个回答

        user-title

        dxy_b6robcae

        有帮助

        从冰箱里拿出来保存的葡聚糖凝胶,第二天用,还需要进行溶胀过夜吗?

        user-title

        vae1476

        有帮助

        样本本身杂质太多或者层析柱污染,都有可能造成这种情况

        user-title

        Lv花开花落

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        1 层析柱必须有柱头及分布器,即adaptor,紧压胶面完合没有空隙,否则样品上样受影响。

        2 凝胶悬浮液不可太稠,否则很容易出气泡;太稀装柱时间过长,亦影响效果。50- 70%较适合。若是干粉,溶胀时间必须充足。装前完全搅匀。

        3 一次性倒入层析柱中,容量不够则需加装柱器。切不可分几次倒,柱效和对称性都很难合格。

        4 装柱及层析工作所用缓冲液的温度需一样。

        5 柱底网下的气泡一定要除掉,可先用20%乙醇湿一下底网。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        一般出现这种情况,是加入样品体积过多。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        在样品过多(样品过载)的情况下,所有凝胶的孔隙被样品充满,样品就会在凝胶颗粒的空隙中通过,先形成一个样品峰,这个样品峰在出峰以后或者出峰的过程中,被凝胶吸附的样品也会脱附出峰,所以就会形成叠峰

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        感觉是你选的凝胶柱不合适,你最好换一个高分辨率的凝胶柱。或者是你的蛋白降解了,杂峰也会多。

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