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Co-IP中没有检测到与目的蛋白相互作用的蛋白或检测得到的信号太弱的原因有那些?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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dxyv9281

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3 个回答

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dxywode

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应选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白;过表达提高目的蛋白的含量:选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。

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whilt-shirt

有帮助

原因有很多,裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈,受蛋白的亚细胞定位影响,蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定,过表达提高目的蛋白的含量。

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dxyjonas

有帮助

(1)裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈:此时降低去垢剂浓度或更换去垢剂种类。

(2)受蛋白的亚细胞定位影响:应重新选择裂解液配方来释放目的蛋白。

(3)蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定:应选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白。

(4)过表达提高目的蛋白的含量:选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈:此时降低去垢剂浓度或更换去垢剂种类。

(2)受蛋白的亚细胞定位影响:应重新选择裂解液配方来释放目的蛋白。

(3)蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定:应选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白。

(4)过表达提高目的蛋白的含量:选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。

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