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        如何从鸡蛋清中提取卵类黏蛋白?

        相关实验:蛋白质的层析纯化

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        黑眼圈PNK4

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        3 个回答

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        府宅

        有帮助

        取新鲜蛋清,搅拌,加入等体积10% pH1.15的TCA溶液,继续搅拌直至絮状消失,调pH到pH3.5±0.2的范围以内。pH值调好后,将烧杯用保鲜膜密封好, 室温下静置4小时。 4000r/min 离心15min,弃沉淀,上清液用滤纸过滤,收集滤液。调pH到pH3.5±0.2的范围以内,边轻轻搅动边加入加3倍体积的预冷丙酮,用塑料薄膜封好杯口,在4℃下放置4h以上。3000r/min离心15min,弃去上清液,离心杯底部沉淀物放入真空干燥器内抽气,除去残留丙酮,然后用20ml蒸馏水溶解,经Sephadex G-25凝胶层析柱脱盐,收集第Ⅰ洗脱峰,得到鸡卵粘蛋白脱盐的粗提取液。4℃下保存好样品,准备进行离子交换层析纯化。

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        ZQ新世界

        有帮助

        取鸡蛋一只,在其底部轻磕一小洞,使蛋清沿小洞慢慢流下,将蛋清液收集到一烧杯中(注意不要使蛋黄混入)。取鸡蛋清50mL,在30℃水浴中,缓慢加入等体积的0.5mol/L三氯乙酸-丙酮溶液(三氯乙酸:丙酮=1:2),边加边搅拌,约30min加完,最后溶液的pH=3.5,继续搅拌30min,置于冰箱中静置4h以上。

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        天一湖医者

        有帮助

        1,取两只新鲜鸡蛋,得蛋清50ml,置于烧杯中,外用温水浴25℃-30℃,在不断搅拌条件下,缓慢加入等体积得三氯乙酸-丙酮(1:2V/V),立即出现大量白色絮状沉淀,加完后最终PH约3.5,再继续搅拌30min,然后在4℃冰箱中放置过夜。

        2,次日用布氏漏斗抽滤,得黄绿色清液。

        3,边搅拌边加入4℃预冷的丙酮200ml沉淀蛋白,在4℃放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm离心5min,收集沉淀。

        4,将沉淀溶于10ml无离子水中,对无离子水(50倍)透析4h,换水两次,再对碳酸钠缓冲液透析过夜,4000rpm离心10min ,去除不溶物。

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