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蛋白诱导表达量低,并且检测不出活性是怎么回事?

相关实验:蛋白质的表达、分离、纯化实验

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单子lcs

携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌 BL21 中,IPTG 诱导下,蛋白表达量偏低,并且检测不出活性!!求高手帮忙指导
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1 个回答

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我是金博士

有帮助
这个问题很常见,能表达出蛋白不容易,表达出的蛋白有活性也不容易。不过不用太着急,可以试着从这几个方面着手: 1、首先要确定是否有目的蛋白条带,是否落在理论大小处。这个可以通过SDS-PAGE来观察。2、如果表达量低,建议优化表达条件,比如改变温度,诱导剂浓度等。然后将蛋白纯化后再测酶活。3、没有活性还有一个可能是你的活性检测方法不对,这个需要你结合实验室基础或者文献来修缮,没有固定的方法。
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