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科研学霸天团,48小时有问必答
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narodrop测蛋白浓度?
bamboopiggy
nanodrop有测蛋白浓度的模块啊,你只要能做一个标准曲线,然后同一波试剂,你就只要测浓度,然后对应标准曲线就可以。
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问
RIP实验跑qpcr 的结果应如何分析?文献都是写%Input ,内参要如何参与计算?
土井挞克树
这个可以先换对数,后取百分比。
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问
请问采用荧光酶标仪检测ROS,DCFH-DA探针的,结果显示的是1.0e5或者2.1e6这样的结果怎么处理?
土井挞克树
你这种情况最好做个对数转换,方便后续处理。
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问
WB跑胶
此用户已注销
我觉得最主要的原因是蛋白样品在制样时,煮沸时间不够,没有充分被SDS包被,变性不充分。2.样品有降解3.上样量太大,分不开4.有时候,如果蛋白含二硫键的话,还原剂量不足,可能会导致蛋白在跑胶过程中的动态成键,也可能形成拖尾
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问
提取小鼠脾脏组织蛋白。
yanlai000
低效率:液氮研磨,研钵加液氮研成粉末中效率:剪碎后冰上用手动研磨器研磨高效率:全自动研磨器,1.5ml EP管加2mm氧化锆研磨珠2-4颗研磨
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问
蛋白跑出两条带后,统计以哪条为主
bamboopiggy
你别只看条带哪个亮,你要看哪个条带能反应出你实验的差异。就用哪个
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问
请问大家组蛋白western blot是用什么封闭的呢,我用的是索莱宝5%bsa,基本每次都是膜全亮,抗体浓度液试了很多次。
简简单单的8872
检测磷酸化蛋白用5%BSA,检测非磷酸化蛋白一般都用5%脱脂牛奶,索莱宝都有卖
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问
提取鼠尾腱胶原蛋白,使用4M的氯化钠进行盐析,一直没有蛋白质析出是什么原因?酸溶过程中出现凝胶状态
土井挞克树
水浴的稳定状态有利于析出蛋白质。
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问
有人研究免疫共沉淀实验吗?rip,pull down实验。
土井挞克树
rna裂解和wb的试剂盒选好一些,对实验很关键。
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问
为什么空白组的细胞,正常培养不给药的也可以表达出炎症因子,甚至比脂多糖刺激的还高?已排除上样量因素
yanlai000
污染,加错样,这两个方面考虑一下
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问
半干转转不过marker在胶上
yanlai000
半干转并不是完全干转,电泳液合不合适,胶和膜有没有干,电压/电流是否合适,时间是否太短,一项一项排查
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问
WB实验所有蛋白要跑在一张膜嘛?
土井挞克树
你可以跑在一张上,但是你的蛋白跑在一张上不好区分,建议分开跑。
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问
关于验证NF-kappaB通路的p65和p-p65
bamboopiggy
这个公司的p-p65主带的位置大概在70kd左右,你切膜往上一点
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问
WB背景不干净 跑的一个大分子蛋白,260k左右,背景总是不干净,请问一下什么原因?
灵枢天问
是不是你抗体没洗干净,洗膜一定要时间够要不然背景也不好看
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问
在职博士 准备做实验 科研小白 需要提前做好哪些准备 脱产时间短,想脱产前尽量准备好
Dr_劉医生
最好的准备就是学习并明白组织、细胞、亚细胞或者遗传水平等实验的逻辑步骤(每一个层面需要哪些实验,这些实验是干嘛的),这个非常关键,在你设计实验方案和理解实验都很有用;具体每个实验的步骤,去实验室待一段时间用心学就会了,
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问
DCA预测模型
Dr_劉医生
把结局变量(outcome variable)转换成二分类就行
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问
血清里的TMAO离开人体后多久失活?
灵枢天问
如果你放在冰上的话,一般三四个小时还可以检测
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问
nanog的wb一直显不出来 请教各位大佬帮帮忙
灵枢天问
如果之前有那可能就是你的抗体经过反复冻融效果不好了
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问
求助,植物总蛋白跑胶染色问题
橙子M1Y8
说审核不通过,不知道为啥,截了个图
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问
WB求助🆘
bamboopiggy
你可以求一个磷酸化蛋白比内参的比值,以及一个磷酸化比总蛋白的比值。如果后者有差异,可以用后者,如果后者没有差异就用前者。
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