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问
提取鼠尾腱胶原蛋白,使用4M的氯化钠进行盐析,一直没有蛋白质析出是什么原因?酸溶过程中出现凝胶状态
土井挞克树
水浴的稳定状态有利于析出蛋白质。
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问
有人研究免疫共沉淀实验吗?rip,pull down实验。
土井挞克树
rna裂解和wb的试剂盒选好一些,对实验很关键。
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问
为什么空白组的细胞,正常培养不给药的也可以表达出炎症因子,甚至比脂多糖刺激的还高?已排除上样量因素
yanlai000
污染,加错样,这两个方面考虑一下
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问
半干转转不过marker在胶上
yanlai000
半干转并不是完全干转,电泳液合不合适,胶和膜有没有干,电压/电流是否合适,时间是否太短,一项一项排查
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问
WB实验所有蛋白要跑在一张膜嘛?
土井挞克树
你可以跑在一张上,但是你的蛋白跑在一张上不好区分,建议分开跑。
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问
关于验证NF-kappaB通路的p65和p-p65
bamboopiggy
这个公司的p-p65主带的位置大概在70kd左右,你切膜往上一点
4 回答
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问
WB背景不干净 跑的一个大分子蛋白,260k左右,背景总是不干净,请问一下什么原因?
灵枢天问
是不是你抗体没洗干净,洗膜一定要时间够要不然背景也不好看
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问
在职博士 准备做实验 科研小白 需要提前做好哪些准备 脱产时间短,想脱产前尽量准备好
Dr_劉医生
最好的准备就是学习并明白组织、细胞、亚细胞或者遗传水平等实验的逻辑步骤(每一个层面需要哪些实验,这些实验是干嘛的),这个非常关键,在你设计实验方案和理解实验都很有用;具体每个实验的步骤,去实验室待一段时间用心学就会了,
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问
DCA预测模型
Dr_劉医生
把结局变量(outcome variable)转换成二分类就行
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问
血清里的TMAO离开人体后多久失活?
灵枢天问
如果你放在冰上的话,一般三四个小时还可以检测
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问
nanog的wb一直显不出来 请教各位大佬帮帮忙
灵枢天问
如果之前有那可能就是你的抗体经过反复冻融效果不好了
3 回答
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问
求助,植物总蛋白跑胶染色问题
橙子M1Y8
说审核不通过,不知道为啥,截了个图
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问
WB求助🆘
bamboopiggy
你可以求一个磷酸化蛋白比内参的比值,以及一个磷酸化比总蛋白的比值。如果后者有差异,可以用后者,如果后者没有差异就用前者。
3 回答
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问
coip求助 coip后打质谱筛选到的蛋白又wb验证不到了为什么呀
bamboopiggy
所以coip的结果,还是要验证的,你最好。同时再挑一个别的蛋白,证明你的ip过程是没有问题的。
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问
Elisa问题
bamboopiggy
取决于你的实验目的,你想看蛋白(酶)的表达还是活性。
3 回答
477 围观
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问
两个月后做wb,细胞裂解测浓度加上样缓冲液煮沸保存还是裂解液直接-80℃保存?
锦鲤正在进行时
煮沸之后吧,裂解液的话一周还可以,时间久了蛋白会降解的,wb显影的时候就信号弱或没信号了
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问
蛋白和定量结果不对应咋整呢?
麻黄连翘赤小豆
定量一般都是定一个量,看蛋白趋势,定量哪里来的趋势,如果说蛋白趋势和预想的相反,你就要看看是不是还有其他分子影响这个蛋白
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问
脱脂奶粉、无蛋白快速封闭液、BSA封闭液那个好用?
balalaLy
脱脂奶粉是最常用的,没有哪个最好用,得根据抗体的特性,有些抗体随便用哪个都可以,有的就得用BSA或商品化的封闭液。
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问
镍柱纯化蛋白浓度过低怎么处理?
此用户已注销
如果想吧蛋白浓度提高一点的话,纯化时减少凝胶的体积,增加洗脱液中的咪唑浓度。
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问
wb电泳压不齐
balalaLy
内槽电泳液漏了,导致电压不稳,电泳过程中要确保电泳液高于玻璃短板以上,电流回路才能是通的。
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