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科研学霸天团，48小时有问必答

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问dot blot实验求助

158 围观

问预制胶成分tris-glycine和tris-Acetate有啥区别以及bis-tris体系

299 围观

问种子内源激素测定的样品提取步骤？

341 围观

问WB为什么整张膜都好像过曝？

276 围观

问慢病毒感染敲低的细胞Qpcr结果反而过表达了！？

502 围观

问WB一点条带都没有怎么回事

135 围观

问WB关于二抗种属的选择

430 围观

问用sephadex g-100纯化蛋白柱子很堵，流速极其慢，请问怎么解决？

百泰派克-李工

使用Sephadex G-100纯化蛋白时，如果遇到柱子堵塞和流速极其慢的问题，可以尝试以下几种方法来解决：1.检查柱子的装填：确保Sephadex G-100介质在装填时均匀且没有空气泡。如果存在空气泡或装填不均，柱子的流动性会受到影响。2.调整样品的体积和浓度：如果样品的体积过大或者浓度过高，会导致柱子堵塞。尝试减少样品的加载量或者稀释样品。3.提高缓冲液的强度：有时候增加缓冲液的强度可以帮助

1 回答543 围观

问WB实验中，GAPDH正常，阳参也正常，就是样品组目的条带不出来是什么原因引起的，有没有大佬有过类似的问题

百泰派克-李工

如果出现以上情况可能有以下几种原因：1.目的蛋白的表达水平低：如果样品中目的蛋白的含量非常低，可能无法被检测到。这可能是由于样品的本质特性或样品处理过程中蛋白丢失引起的。2.抗体特异性问题：使用的一抗或二抗可能对目的蛋白的识别能力不足。确保抗体的特异性和活性。如果可能，尝试更换抗体。3.样品制备问题：样品在制备过程中可能发生了蛋白降解或损失。检查样品制备过程中是否有可能导致蛋白降解的步骤，如样品是

1 回答919 围观

问WB结果分子量增加了20kDa,怎么去磷酸化、去糖基化来验证翻译后的修饰

百泰派克-李工

Western Blot（WB）实验中，若观察到某蛋白的分子量相比预期增加了20kDa，这可能表明该蛋白经历了翻译后修饰。为了验证这一点，你可以采取以下步骤：一、去磷酸化验证1.样品准备：首先，确保你有足够的蛋白样品。2.选择适当的磷酸酶：通常使用碱性磷酸酶（如Lambdaprotein phosphatase）或其它专门的去磷酸化酶。3.进行磷酸酶处理：根据酶的说明书进行操作，通常是在特定的缓冲

1 回答735 围观

问胶体金t线颜色浅c颜色深怎么改良

325 围观

问求助WB跑mTOR分子，分子量289KDa,最近有没有大佬做出来的，教练我

151 围观

问WB实验我需要有什么准备?

百泰派克-李工

在进行Western Blot（WB）实验之前，有几个关键准备工作需要完成：一、实验设计:二、样品准备:三、电泳准备:四、转膜准备:五、膜阻断和抗体孵育:六、检测:七、其他材料和设备:八、实验记录和数据分析:在进行WB实验之前，建议仔细阅读相关的操作手册，如果有必要，可以先进行小规模的预实验来优化条件。对于实验中可能出现的问题，准备一些排错策略也是非常有帮助的。

1 回答387 围观

问现在想表达的蛋白所在载体带的是GFP,想把荧光蛋白换成CFP要怎么做啊？

234 围观

问请问怎么用高效液相识别水体中蓝绿藻的演替呀

百泰派克-李工

蓝绿藻演替主要是指不同种类蓝绿藻在水体中的优势地位随环境变化而发生的变化。使用HPLC进行此类研究的一般步骤如下：1.样品采集：2.样品处理：3.色谱分析：4.检测：5.数据分析：二、注意事项1.色素稳定性：2.色谱条件优化：3.标准品对照：4.重复性和准确性：

1 回答272 围观

问请问细胞养了怎么去做qPCR和WB?

152 围观

问怎么看慢病毒包装的效率如何?

418 围观

问MOI值受什么影响呢?

383 围观

问 Sephadex LH-20溶胀后脱气泡一般脱多长时间啊？

258 围观

问一抗孵育时间，4度过夜还是常温2小时？

428 围观

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