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实验问答24,980,108 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

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问人的抗体什么情况下可以给鼠用

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问WB做炎症通路趋势重复不出来怎么办？是什么原因呢？

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问20mM的硝酸银溶液怎么配置

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问怎么样配制标准20mM硝酸银溶液？

266 围观

问WB出现异常大的条带

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问wb 实验出现“波浪”条带

597 围观

问求问WB 的目的蛋白分子量160kDa，转膜条件怎么设定

百泰派克-李工

在进行Western Blot（WB）分析时，如果目标蛋白的分子量为160 kDa，转膜条件应该注意以下几点：1.膜材料：对于大分子蛋白（如160 kDa），通常推荐使用PVDF（聚偏氟乙烯）膜，因为它具有更高的蛋白结合能力。2.转膜缓冲液：使用含有适量甲醇的转膜缓冲液。甲醇有助于蛋白质更好地结合到PVDF膜上，但过多的甲醇可能会导致蛋白质过度聚集，影响转移效果。通常，缓冲液中甲醇的比例为10-2

2 回答610 围观

问如何验证两蛋白结合水平发生改变？

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问WB相同来源的一抗可以同时孵育吗

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问dot blot实验求助

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问预制胶成分tris-glycine和tris-Acetate有啥区别以及bis-tris体系

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问种子内源激素测定的样品提取步骤？

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问WB为什么整张膜都好像过曝？

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问慢病毒感染敲低的细胞Qpcr结果反而过表达了！？

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问WB一点条带都没有怎么回事

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问WB关于二抗种属的选择

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问用sephadex g-100纯化蛋白柱子很堵，流速极其慢，请问怎么解决？

百泰派克-李工

使用Sephadex G-100纯化蛋白时，如果遇到柱子堵塞和流速极其慢的问题，可以尝试以下几种方法来解决：1.检查柱子的装填：确保Sephadex G-100介质在装填时均匀且没有空气泡。如果存在空气泡或装填不均，柱子的流动性会受到影响。2.调整样品的体积和浓度：如果样品的体积过大或者浓度过高，会导致柱子堵塞。尝试减少样品的加载量或者稀释样品。3.提高缓冲液的强度：有时候增加缓冲液的强度可以帮助

1 回答585 围观

问WB实验中，GAPDH正常，阳参也正常，就是样品组目的条带不出来是什么原因引起的，有没有大佬有过类似的问题

百泰派克-李工

如果出现以上情况可能有以下几种原因：1.目的蛋白的表达水平低：如果样品中目的蛋白的含量非常低，可能无法被检测到。这可能是由于样品的本质特性或样品处理过程中蛋白丢失引起的。2.抗体特异性问题：使用的一抗或二抗可能对目的蛋白的识别能力不足。确保抗体的特异性和活性。如果可能，尝试更换抗体。3.样品制备问题：样品在制备过程中可能发生了蛋白降解或损失。检查样品制备过程中是否有可能导致蛋白降解的步骤，如样品是

1 回答1088 围观

问WB结果分子量增加了20kDa,怎么去磷酸化、去糖基化来验证翻译后的修饰

百泰派克-李工

Western Blot（WB）实验中，若观察到某蛋白的分子量相比预期增加了20kDa，这可能表明该蛋白经历了翻译后修饰。为了验证这一点，你可以采取以下步骤：一、去磷酸化验证1.样品准备：首先，确保你有足够的蛋白样品。2.选择适当的磷酸酶：通常使用碱性磷酸酶（如Lambdaprotein phosphatase）或其它专门的去磷酸化酶。3.进行磷酸酶处理：根据酶的说明书进行操作，通常是在特定的缓冲

1 回答834 围观

问胶体金t线颜色浅c颜色深怎么改良

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