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        WB实验中,GAPDH正常,阳参也正常,就是样品组目的条带不出来是什么原因引起的,有没有大佬有过类似的问题

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        dxy_pny1f5y3


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        1 个回答

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        百泰派克-李工

        有帮助

        如果出现以上情况可能有以下几种原因:

        1.目的蛋白的表达水平低:

        如果样品中目的蛋白的含量非常低,可能无法被检测到。这可能是由于样品的本质特性或样品处理过程中蛋白丢失引起的。

        2.抗体特异性问题:

        使用的一抗或二抗可能对目的蛋白的识别能力不足。确保抗体的特异性和活性。如果可能,尝试更换抗体。

        3.样品制备问题:

        样品在制备过程中可能发生了蛋白降解或损失。检查样品制备过程中是否有可能导致蛋白降解的步骤,如样品是否充分裂解,裂解液是否合适,是否加入了蛋白酶抑制剂等。

        4.加载量不足:

        如果加载的样品量不够,可能导致目的蛋白含量低于检测限。考虑增加样品的加载量。

        5.转膜效率问题:

        可能是样品在电泳过程中未能有效转移到膜上。检查电泳和转膜步骤,确保操作正确。

        6.检测方法灵敏度不足:

        使用的检测方法可能不够灵敏,无法检测到低浓度的目的蛋白。尝试使用更灵敏的检测方法。

        如果遇到这类问题,可以尝试对照上述列表逐一排查并调整实验条件。多注意实验过程中的细节控制,也可以与实验室的同行或导师讨论,获取他们的意见和建议,也是解决问题的一个有效途径。


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