登录
搜索
提问
我要登录
|免费注册
首页
>
实验问答
>
蛋白质
实验问答
22,817,064 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
为什么敷出来的wb条带是这个样子的,会变成浅条带
麻黄连翘赤小豆
板子没夹好,再跑一次就行了,转膜不均匀,滤纸可以换一下新的排除滤纸的问题
5 回答
393 围观
5 回答
393 围观
去回答
问
请问为什么IP的igg会出现目的条带呢
你好几和户
原因可能是没洗干净,随便再用几种其它抗体,可能也能检测到类似条带。
5 回答
3055 围观
5 回答
3055 围观
去回答
问
细胞培养基里的分泌蛋白怎么提取?提出来以后还要加到另一个细胞培养基里
天一湖医者
将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可.也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可.吸水剂用过后,可放入温箱中烘干或自然干燥后,仍可再用.
3 回答
2048 围观
3 回答
2048 围观
去回答
问
Wb拔梳子之后发现碎胶
dxy_n0zw4do0
一般在拔梳子时,先把制好的胶板放入电泳槽中后,加上缓冲液后,如果制好的胶板比较久,可以在缓冲液稍等一两分钟,然后用两手同时均匀的用力去拔。这样胶不易碎。
5 回答
1057 围观
5 回答
1057 围观
去回答
问
PI3K/AKT/mTOR信号通路 WB相关疑问?
天一湖医者
一个是PI3K/AKT/mTOR信号通路这个是存在磷酸化的,我觉得你在提蛋白的时候需要加磷酸化抑制剂。二个是你可以跑个18s看看,我觉得大概已经出来了有几个下调的,整体上抑制这个通路
3 回答
1479 围观
3 回答
1479 围观
去回答
问
WB目的蛋白底下出现一条非常强烈的条带
天一湖医者
有可能是因为多克隆抗体,特异性不强。识别其他蛋白含量比较多的蛋白,所以非目的蛋白颜色就比较深。
5 回答
493 围观
5 回答
493 围观
去回答
问
【求助】间接ELISA的一个空白对照孔的OD450值高过样品孔,这是咋回事呢?有改进办法不
Eason老歌迷
如果不是竞争ELSIA法的话,也是有可能的。正常情况是样品OD值和空白孔OD值都比较低,样品OD值略低于空白孔OD值。但是如果样品OD值比空白0D值低得多,恐怕就要考虑空白孔设定是否合适的问题了。
2 回答
920 围观
2 回答
920 围观
去回答
问
PI3K/AKT/mTOR信号通路 WB求助
Eason老歌迷
有几个原因。一个是PI3K/AKT/mTOR信号通路这个是存在磷酸化的,我觉得你在提蛋白的时候需要加磷酸化抑制剂。二个是你可以跑个18s看看,我觉得大概已经出来了有几个下调的,整体上抑制这个通路。
2 回答
3211 围观
2 回答
3211 围观
去回答
问
求助|活化的b细胞形态正常吗?
Eason老歌迷
感觉还行,还是有一些活化的细胞存在,但是形态不是太好。
2 回答
440 围观
2 回答
440 围观
去回答
问
wb:500多kda的大分子怎么跑
天一湖医者
选对凝胶很重要 3种最常见的凝胶包括Tris-Glycine, Bis-Tris and Tris-Acetate. Tris-Glycine凝胶的PH为8.6,且保质期很短。在跑胶的过程中,PH还有上升的趋势,可达到9.5。这会导致蛋白降解和低分辨率。 Bis-Tris凝胶的PH为6.4,相对Tris-Glycine凝胶,稳定性和保质期都有所增加。但这种凝胶需要在溶液中增加抗氧化剂,比如DTT
3 回答
3969 围观
3 回答
3969 围观
去回答
问
WB曝光时间为什么不一样
Eason老歌迷
没事,正常现象,wb显影可以据信号的强弱适当调整曝光时间,你选一个显影效果最佳的时间即可。可能是你的抗体用时间长了的问题,或者你没有放-20℃保存好
3 回答
1358 围观
3 回答
1358 围观
去回答
问
做WB,核蛋白跑不进分离胶是怎么回事啊
whilt-shirt
有可能是电泳液的原因,建议重新配置电泳液
3 回答
581 围观
3 回答
581 围观
去回答
问
为什么western的内参调齐了一次之后,再按齐的上样量跑actin又不齐了
yanlai000
确定上样量一致,转膜条件一致,换配胶方式有可能会有这种情况
4 回答
652 围观
4 回答
652 围观
去回答
问
WB条带问题分析
Eason老歌迷
可能是你的样品问题,比如说你没有在冰上裂解,蛋白降解了。也可能是你的胶切错了,把目的条带切掉了。一抗二抗混了,没有孵育好。
3 回答
450 围观
3 回答
450 围观
去回答
问
蛋白质拓扑结构示意图绘制
bamboopiggy
这个可以用AI,自己画,如果你已经知道你的蛋白的结构的话
2 回答
873 围观
2 回答
873 围观
去回答
问
角蛋白10和细胞角蛋白10
Eason老歌迷
是的,细胞角蛋白10是分子量56.5KD的①型细胞角蛋白。
2 回答
431 围观
2 回答
431 围观
去回答
问
WB出现奇怪的线性条带
麻黄连翘赤小豆
多克隆抗体也可能这样,特异性较差
4 回答
259 围观
4 回答
259 围观
去回答
问
Wb‖条带粗怎么办?
whilt-shirt
有可能是上样量过高,建议减少上样量试试
3 回答
2015 围观
3 回答
2015 围观
去回答
问
求助:用了新的蛋白上样缓冲液后,SDS没有条带
冷泉港蛋白
需要知道上样缓冲液各组分及其浓度和特点,undefined上样含有4 %的sds,四度会结晶,需要恢复室温并混匀后使用。你加的上样缓冲液估计不含或含有很少的sds,不足以解离细胞或提供蛋白前进所需要的负电荷了。
4 回答
346 围观
4 回答
346 围观
去回答
问
求助|flag-beads是自带抗性吗?
bamboopiggy
对,flag-beads是自带flag抗体的beads,你只要binding完了,煮了以后,要先用flag的一抗去杂,加二抗显影就可以。
3 回答
1811 围观
3 回答
1811 围观
去回答
1
•••
108
109
110
111
112
•••
172
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序