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        低丰度蛋白跑western blot

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        奶油泡芙bb

        求助如何做低丰度蛋白,感觉做wb很困难啊,大家跑这类蛋白一般上样量和抗体稀释度什么条件呢

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        3 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        我之前跑过低丰度蛋白的wb,给你两个小建议,一个是二抗浓度的把握要精准,在能呈现目的条带时降低二抗非特异性结合的概率。二是增加Tween-20的工作浓度,用更改过的工作浓度去配置TBST清洗,背景的效果可能会改善不少,自然而然目的条带也会展现出来了。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        增加上样量至10-20ul,一抗稀释比例提高到1:500试试

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可以加大上样量,同时提高抗体浓度,但具体怎么做还是要看预实验的结果

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