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        转染miR mimic,靶基因的mRNA反而升高了,靶基因的蛋白时有时无的降低是什么情况

        相关实验:miRNA 克隆实验

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        yqyq28

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        3 个回答

        user-title

        龙大人驾到

        有帮助

        当转染miRNA mimic(miR mimic)后,靶基因的mRNA反而升高,而靶基因的蛋白时有时无的降低,可能存在以下几种情况:


        1. miRNA的靶向调控机制复杂:miRNA可以通过与靶基因的3'非翻译区(3' UTR)结合,导致mRNA的降解或抑制翻译,从而调控基因表达。然而,miRNA的调控机制非常复杂,可能受到其他转录因子、蛋白质相互作用和细胞环境等多种因素的影响。因此,miRNA转染后靶基因的表达变化可能不仅仅受到miRNA的直接调控,还可能受到其他因素的调节。


        2. 逆向效应:有时,miRNA转染可能引起逆向效应,即miRNA mimic与其他基因或信号通路发生非特异性相互作用,导致靶基因的表达发生变化。这可能是由于miRNA mimic的高浓度导致非特异性效应或细胞内信号通路的复杂交互作用所致。


        3. 转染效率和细胞异质性:miRNA mimic的转染效率可能存在差异,不同细胞或细胞系对miRNA mimic的响应也可能存在差异。此外,细胞异质性(细胞内各个亚群的差异)可能导致miRNA转染后的表达变化不一致。


        4. miRNA与靶基因的复杂互作:miRNA与其靶基因之间的相互作用可能是复杂的,并受到多个miRNA和靶基因的调控。miRNA mimic的转染可能会干扰细胞内miRNA网络,导致靶基因表达的复杂变化。


        针对以上情况,可以尝试以下解决方案:


        - 进一步验证miRNA与靶基因的相互作用:通过使用miRNA靶向预测算法、miRNA诱导的mRNA降解实验或miRNA靶向突变实验等方法,进一步验证miRNA与目标基因之间的相互作用,并确定miRNA在调控靶基因表达中的作用。


        - 考虑其他调控机制:除了miRNA,还可能存在其他调控因素对目标基因表达的影响。可以进一步研究其他转录因子、蛋白质相互作用或细胞信号通路等,以了解靶基因表达变化的原因。


        - 优化实验条件和细胞模型:优化miRNA mimic的转染条件和细胞模型,确保转染效率和可重复性,减少细胞异质性对结果的影响。


        综上所述,miRNA转染后靶基因表达的复杂变化可能涉及多种因素,需要进一步研究和验证才能确定具体的调控机制。

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        高山云初

        有帮助

        其原因可能在于细胞内外源性的miRNA与小RNA分子竞争性结合某些细胞内装置,从而引起一种“饱和效应”。

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        土井挞克树

        有帮助

        这说明问题出在蛋白表达上,可以看一下是不是翻译的序列有差错导致的表达问题

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