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分子克隆实验 SDS-PAGE分离胶和浓缩胶配方

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  • 2025年07月14日
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    上海甄准生物科技有限公司
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    溶液成分 不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）
    5 10 15 20 25 30 40 50
    6%                
    水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 1.0 2.0 3 4 5 6 8 10
    1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
    10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    10%过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04
    8%                
    水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.2
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 1.3 2.7 4 5.3 6.7 8 10.7 13.3
    1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
    10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    10%过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.015 0.018 0.024 0.03
    10%                
    水 1.9 4 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 1.7 3.3 5 6.7 8.3 10 13.3 16.7
    1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
    10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    10%过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02
    12%                
    水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9 13.2 16.5
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 2 4 6 8 10 12 16 20
    1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
    10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    10%过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02
    15%                
    水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.9 9.2 11.5
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 2.5 5 7.5 10 12.5 15 20 25
    1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
    10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    10%过硫酸氨 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5
    TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02
     


    2.配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝胶电泳5%积层胶（浓缩胶）所用溶液 上海甄准生物科技有限公司

    溶液成分 不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）
    1 2 3 4 5 6 8 10
                     
    水 0.68 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5 6.8
    30%
    Acrylamide
    溶液    		 0.17 0.33 0.5 0.67 0.83 1 1.3 1.7
    1.0 mol/L Tris (pH6.8) 0.13 0.25 0.38 0.5 0.63 0.75 0 1.25
    10% SDS 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08 0.1
    10%过硫酸氨 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08 0.1
    TEMED 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.008 0.01
     

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    • 干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

      泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中，一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的，并且在说明书中，以配置2块胶为例，分离胶说明书中是让配置10ml，压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系，在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系，人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已，虽然在一个纵列上，但是绝不是对应关系（我确实才觉悟，高手轻鄙视哈）。5、接上一条经验，所以我在配胶过程中，下层分离胶配制了10ml，但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧，也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩

    • 【原创】Tricine SDS-PAGE凝胶配方（16.5％）

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