• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        siRNA转染后,基因反而上调

        相关实验:RNA 干扰技术

        user-title

        cinco呀

        我买了吉玛的三保一siRNA,转染后跑了三个siRNA的qpcr,结果不仅没沉默,反而全部上调了,有没有大神知道是怎么一回事啊?NC组和空白组差异不显著,管家基因的CT值从17左右上升到19左右,转染后24h收的样,求求大神指点迷津啊

        wx-share
        分享

        4 个回答

        user-title

        dxy_8nqn3sh7

        有帮助

        我也是,同一个公司购买的干扰。转染反而上调了。

         

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1试试转染后48h收样,24h时间有点短 2注意一下你的qpcr的引物的melt curve是否是单峰

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        应该是转染效率太低了,转染效率低导致进入细胞的siRNA比较少,刺激细胞产生应激反应,导致目的基因不降反而升高,转染效率高的话就没事了。

        PS:如果转染效率很好,但没有干扰,是序列不行,要换干扰序列。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        三个SiRNA全部上调可能是由于转染的SiRNA浓度过高,导致了细胞的非特异性反应。另外,还有可能是您的qPCR实验出现了技术问题。建议您重新检查SiRNA的浓度和质量,以及优化qPCR实验的条件,例如优化引物浓度和放大条件等。此外,您可以尝试使用其他的SiRNA转染试剂或者其他的SiRNA设计和合成公司。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序