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        siRNA转染

        相关实验:RNA 干扰技术

        user-title

        Saynooo

        请教一下大家关于siRNA的问题,首先是分组问题,现在看到的文献多数都是用两条siRNA+阴性对照,想问问为什么不需要空白对照呢?siRNA敲低实验到底应该怎么分组呢?第二是我购买了三条siRNA,但是在两种细胞的敲低效果不一样(就是一种细胞效果最好的是第三条,其次是第一条,另一种细胞效果最好的是第一条,其次是第三条,而且我用的转染试剂也不一样,因为第二种细胞在筛的时候效果不好,把lipo2000换成了lipo6000),但是我查别人文献里有效siRNA序列在不同细胞效果都是同样的,这是我做得有问题吗?这种情况是可以存在的吗?

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        有的人喜欢加个mock组,但是一般不用,只要有实验组和对照组就可以,不一定非要加空白对照。至于你第二隔问题,可能是你siRNA的不同组之间的转染效率不太一样,不过没关系,只要有敲低,并且有相应的蛋白的改变,就可以的。

        user-title

        Saynooouser-title

        感谢,那我就上实验组和NC组了,第二个问题就是,因为有效序列不一样放图应该会看起来很乱,所以不知道这样行不行。

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        我看的文献都有空白对照,不同细胞敲减效果一样没有见过啊

        user-title

        Saynooouser-title

        感谢,我看很多瞬时转染的分组是NC+两条有效序列,也有空白+NC+一条有效序列,所以有点疑惑不知道到底怎么分组,第二就是有效序列不一样的问题,因为我也没看见有文章是这种情况不知道是不是自己做得不对不敢下结论。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        如果在两种细胞的敲低效果不一样,建议分别设置对照组。

        user-title

        Saynooouser-title

        感谢回答,我每次不同样本都有同时做对照,现在的问题是我不太清楚这种结果在发文章的时候是不是分开写就行,而且我们还涉及到毕业论文,感觉很乱。

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