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        小片段RNA干扰致基因表达沉默的具体步骤有哪些?

        相关实验:RNA 干扰技术

        user-title

        nianziii

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        3 个回答

        user-title

        Kimser

        有帮助

        1,制备sirna,有化学合成法和转录法,其中还涉及shrna和Ago蛋白

        2,转染宿主细胞

        3,检测靶基因是否沉默

        user-title

        菲菲飞呀飞

        有帮助

        步骤一 确定干扰基因,设计并合成合适的小干扰RNA(片段型或载体型小干扰RNA)。

        步骤二 预转染实验,进行细胞培养,摸索转染条件、时间并进行必要的检测(WB,PCR 等),确定干预效果最佳的一对小RNA。

        步骤三 正式实验,设置合理实验分组,进行瞬时或稳定转染。

        步骤四 转染后检测,根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1.设计小rna,订购小rna

        2.转染细胞

        3收样,检测基因是否沉默

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