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        RNAi 和PRISPR对比,哪个技术更好呢?

        相关实验:RNA 干扰技术

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        RIRI00

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        4 个回答

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        上海欧易

        有帮助

        RNAi与CRISPRi的主要区别在于其发挥沉默基因功能的水平不同:

        RNAi技术是通过双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发同源RNA高效特异性降解,从而导致基因沉默,其作用位置为细胞质,相对更适用于mRNA,优点是技术成熟,操作简单。

        CRISPRi技术是能抑制指定目标的转录,不论是编码还是非编码的DNA片段。CRISPRi使用催化失活的Cas9(dCas9),dCas9能到达引导RNA指定的位点,但无力对DNA进行剪切(Cell, 152:1173-83, 2013)。当dCas9结合到基因组的时候,会阻断转录机器的结合,阻止这一过程的进行。因此这一技术的的干扰效率更高且脱靶风险更低,并且更适用于一些在细胞核内发挥功能的非编码RNA研究。

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        Kimser

        有帮助

        个人认为后者更好一些。RNAi 是一种基因下调方法,但并不能完全去除基因的功能。而CRISPR是在引导 RNA 的指导下,与目的核酸片段进行靶向结合并进行切割。此外,尽管 RNAi 和 CRISPR 均存在脱靶问题,但由于CRISPR脱靶效率要远低于RNAi。

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        府宅

        有帮助

        RNAi和CRISPR/Cas9的筛选精确性都很高。不过这两种技术筛选出来的基因并不相同,而且CRISPR鉴定出的必需基因更多。

        多功能的CRISPR技术让一系列的基因修饰(CRISPR-KO、CRISPRi和CRISPRa)得以实现。

        因此,它已取代RNAi成为首选的功能基因组筛选工具CRISPR基因敲除的效率以及高特异性和低背景,与RNAi形成了鲜明对比。RNAi的优势在于依靠内源性RNA沉默机制,因此在操作上是最简单的方法。

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        丁香粉猪猪

        有帮助

        目前,基因干扰方面应用最广泛最成熟的还是短发卡RNA(shRNA)介导的RNAi技术。过去十几年,RNAi一直是基因功能研究尤其是功能基因组学筛选的首选方法。但是CRISPR技术的横空出世,凭借着更低的脱靶效率,更高的干扰水平,因此通常,CRISPRi拥有比RNAi更高的干扰效率和更低的脱靶风险,在基因干扰能力上显著优于传统的RNAi技术。

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