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        细胞量很少,能做PCR吗

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

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        科研人加油

        骨髓内流式细胞技术筛选出很少的细胞,可以直接做pcr检测基因吗?

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        4 个回答

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        来一起探讨

        有帮助

        骨髓内流式细胞技术筛选出的细胞可以直接进行pcr检测,若细胞量较少时,可以先进行扩增获得更多样品进行后续实验。

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        sswei

        有帮助

        如果实在量太少不行可以考虑加大反应体积,将回收产物再次跑pcr

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        huarenqiang5

        有帮助

        骨髓内流式细胞技术筛选出的细胞,可以直接做pcr检测基因。

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        loveliufudan

        有帮助

        如果您的骨髓样品经过流式细胞术筛选后只获得很少的细胞,直接进行PCR检测可能会面临一些挑战。这是因为PCR通常需要足够的起始DNA模板以产生可靠的结果。

        在这种情况下,您可以考虑以下几点:

        1. 预扩增:预扩增是一种通过增加目标序列的拷贝数来增加起始DNA模板的方法。在预扩增过程中,使用引物对目标序列进行有限的扩增,从而产生更多的模板用于后续的PCR分析。

        2. 增加PCR反应的敏感性:可以尝试优化PCR反应条件以提高PCR的敏感性,例如增加起始模板的浓度、优化引物的浓度和设计等。

        3. 增加PCR循环数:增加PCR循环次数可以增加目标序列的扩增量,从而增加检测的灵敏度。但请注意,过多的PCR循环次数可能导致非特异性扩增或引起其他PCR问题。

        4. 使用高灵敏度的检测方法:如果您关注的目标基因表达水平较低,可以考虑使用高灵敏度的PCR方法,如荧光定量PCR(qPCR)或数字PCR(dPCR)。这些方法可以检测低拷贝数的目标序列。

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