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        qpcr结果分析求问

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        dxy_seo624v8

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        图片描述

        如图,目的基因扩增异常,溶解曲线很奇怪,但同一样本内参基因扩增和溶解曲线正常,请问可能是什么问题呢?

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        6 个回答

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        dxy_t3td6v30

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        样品没问题,可能是引物扩增效率不行,或者循环数不对。

        user-title

        yuntm

        有帮助

        可能是引物不行,再做一次试试吧

        user-title

        信生元

        有帮助

        出现这种问题,大多原因是引物。可以重新设计引物再做一次。内参的Ct值如果在18以上,说明cDNA的质量也不太好。建议重新提取做反转录。

        user-title

        dxy_h8heikw2

        有帮助

        内参正常,可能是温度和你的目的基因的引物不匹配,可以调整一下温度,然后你加样的时候可以预混分装,减少误差

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        土井挞克树

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        内参扩增到条带,能够说明你的实验试剂,引物质量没问题。目的基因没条带可能是扩增条件不合适,建议你做一下对照,35个循环做一下。出现条带的扩增条件说明是合适的

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        Luckybabygirl

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        感觉那个溶解曲线有点断断续续的,可以再做一次,如果排除人为操作等影响,可以考虑是引物设计的不匹配,第二个图里杂峰很多,注意无菌操作,以及加样时混匀,手稳一点

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